水环境监测工技术员培训高效液相色谱.ppt

*;1 高效液相色谱分析概述 1.1 高效液相色谱法的概念 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法，注入的供试品由流动相带入柱内，各成分在色谱柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、数据处理系统记录色谱信号。 高效液相色谱法采用了全多孔微粒固定相，装填在小口径、短不锈钢色谱柱内，通过高压输液泵将流动相泵入高压的色谱柱内，溶质在固定相中的传质速度大大加快，从而在短时间内获得高柱效和高分离度。由于紫外、荧光、电化学等高灵敏度检测器的使用，高效液相色谱的柱后反应检测灵敏度可达皮克数量级（10-12g），现在的高效液相色谱配有计算机，不仅能够自动处理数据，绘图和打印分析结果，而且能够对仪器的全部操作包括流动相选择，流量、柱温、检测器波长的选择，进样、梯度洗脱方式等进行程序控制，实现了仪器的全自动化。;*;1.2 高效液相色谱分类;正相色谱中流动相的主体为己烷、庚烷，可加入20%的极性改性剂，如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醇、乙腈等，主要用来分离极性化合物，被分离组分按极性从小到大的顺序流出色谱柱；反相色谱中流动相的主体为水，也可加入一定量的改性剂，如乙腈、甲醇、丙酮、乙醇、四氢呋喃、异丙醇等，主要用来分离非极性化合物，被分离组分流出顺