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一种低免疫原性的CRISPR-Cas9核酸蛋白复合物的制备方法及其应用.pdfVIP

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  • 2023-05-17 发布于四川
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一种低免疫原性的CRISPR-Cas9核酸蛋白复合物的制备方法及其应用.pdf

    本发明公开了一种低免疫原性的CRISPR‑Cas9核酸蛋白复合物的制备方法及其应用，其中，适用于临床的低免疫原性的重组Cas9RNP制备方法，通过将Cas9RNP表达载体和碱性磷酸酶表达载体共转到大肠杆菌，进行双抗性标记筛选和诱导表达，并通过亲和纯化制备Cas9RNP。本发明制备的Cas9核酸蛋白复合物具有较强的稳定性和优异的细胞内基因编辑活性，相较于传统的体外重组生产Cas9RNP的方法，本发明方法在大肠杆菌细胞内直接获得5’‑OH的gRNA，省去了合成gRNA昂贵的生产成本，因而更加经济、简

    (19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114807132 A (43)申请公布日 2022.07.29 (21)申请号 202210368648.9 C12N 9/22 (2006.01)

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