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第1页/共82页工程科技发酵培养基第2页/共82页第三章 发酵培养基 培养基：广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。 发酵培养基的作用： 满足菌体的生长 促进产物的形成第3页/共82页发酵培养基的要求① 满足产物最经济的合成。② 发酵后所形成的副产物尽可能的少。③ 培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应。④ 所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不影响通气、提取、纯化及废物处理等。第4页/共82页第一节 培养基的类型及功能培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型 一、按纯度 合成培养基 : 原料其化学成分明确、稳定 适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律 培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产 天然培养基: 采用天然原料 原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业化生产 原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性 第5页/共82页培养大肠杆菌常用两种培养基M培养基(1L)： Na2HPO4 6 g，KH2PO4 3 g， NaCl 0.5 g， NH4Cl 1 g， MgSO4·7H2O 0.5 g， CaCl2 0.011 g，葡萄糖 2-10, pH 7.0 YPS培养基：酪蛋白胨10 g，酵母提取物5 g, NaCl 10 g，PH 7.2 第6页/共82页二、按状态固体培养基: 适合于菌种和孢子的培养和保存，也广泛用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产 半固体培养基: 即在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8% ,主要用于微生物的鉴定。液体培养基: 80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。 三、按用途（从发酵生产应用考虑） 培养基按其用途可分为孢子（斜面）培养基、种子培养基和发酵培养基三种 第7页/共82页第二节 发酵培养基的成分及来源 一、碳源1、作用 提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分； 提供合成目的产物所必须的碳成分。2、来源糖类、油脂、有机酸、低碳醇第8页/共82页3、工业上常用的糖类① 葡萄糖 所有的微生物都能利用葡萄糖 但是会引起葡萄糖效应 工业上常用淀粉水解糖，但是糖液必须达到一定的质量指标第9页/共82页葡萄糖效应: 分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。 如大肠杆菌在含葡萄糖和乳糖的培养基上，葡萄糖未被利用完之前，乳糖操纵子就一直被阻遏，乳糖不能被利用。 原因：葡萄糖的分解物引起细胞内cAMP含量降低，启动子释放cAMP-CAP（catabolic gene activator protein）蛋白，RNA聚合酶不能与乳糖的启动基因结合，导致转录不能进行，直到葡萄糖被利用完后，乳糖操纵子才进行转录，形成利用乳糖的酶。 第10页/共82页不同的制糖工艺生产的糖液质量差别很大第11页/共82页② 糖蜜糖蜜是制糖生产时的结晶母液，它是制糖工业的副产物。 糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%～75%。一般糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。第12页/共82页不用加工方法对甘蔗糖蜜的影响第13页/共82页糖蜜使用的注意点：除糖份外，含有较多的杂质，其中有些是有用的，但许多都会对发酵产生不利的影响，需进行预处理。例：谷氨酸发酵有害物资：胶体成分（起泡、结晶）、钙盐（结晶） 生物素（发酵控制）预处理：澄清→脱钙→脱除生物素例：柠檬酸发酵有害物质：铁离子含量高（导致异柠檬酸的生成）预处理：→黄血盐 K4Fe(CN)6·3H2O 第14页/共82页③ 淀粉、糊精使用条件：微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类缺点：难利用、发酵液比较稠、一般2.0%时加入一定的α-淀粉酶成分比较复杂，有直链淀粉和支链淀粉等等。优点： 来源广泛、价格底 可以解除葡萄糖效应第15页/共82页例：地衣牙孢杆菌生产α-淀粉酶碳源对生长和产酶的影响碳源 细胞量α-淀粉酶葡萄糖4.2 0 蔗糖4.02 0糊精3.06 38.2淀粉3.09 40.2第16页/共82页李江华，无锡轻工大学学报，2004(1.5 g 麸皮)第17页/共82页二、氮源 氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。 常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。 1、无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水特点：微生物对它们的吸收快，所