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(三)灭菌效率的计算 1、分批灭菌的阶段 若灭菌温度恒定为T,那么到规定灭菌度(N) 所需杀菌时间 当灭菌℃随时间变化时,K也变化,则有 积分 现在是30页\一共有72页\编辑于星期六 用V表示灭菌效果,则有 V总=ln(N0/NS)=V加+V保+V冷 升温、维持和冷却过程中灭菌效果分别为 V加 V保 V冷 现在是31页\一共有72页\编辑于星期六 现在是32页\一共有72页\编辑于星期六 现在是33页\一共有72页\编辑于星期六 现在是34页\一共有72页\编辑于星期六 现在是35页\一共有72页\编辑于星期六 现在是36页\一共有72页\编辑于星期六 现在是37页\一共有72页\编辑于星期六 现在是38页\一共有72页\编辑于星期六 现在是39页\一共有72页\编辑于星期六 现在是40页\一共有72页\编辑于星期六 现在是41页\一共有72页\编辑于星期六 现在是42页\一共有72页\编辑于星期六 现在是43页\一共有72页\编辑于星期六 现在是44页\一共有72页\编辑于星期六 现在是45页\一共有72页\编辑于星期六 现在是46页\一共有72页\编辑于星期六 现在是47页\一共有72页\编辑于星期六 [例题1] 现在是48页\一共有72页\编辑于星期六 现在是49页\一共有72页\编辑于星期六 现在是50页\一共有72页\编辑于星期六 现在是51页\一共有72页\编辑于星期六 培养基灭菌及设备详解演示文稿 现在是1页\一共有72页\编辑于星期六 (优选)培养基灭菌及设备 现在是2页\一共有72页\编辑于星期六 3、干热灭菌 160℃~250℃干燥保温。用于须保持干燥的器具和材料。 4、湿热灭菌 高压饱和蒸汽。通常120℃维持20~30min。 5、过滤除菌 现在是3页\一共有72页\编辑于星期六 二、微生物的热死及耐热性 (一)湿热灭菌的原理 每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时,代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时,微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性,使微生物在很短时间内死亡,加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。 现在是4页\一共有72页\编辑于星期六 (二)微生物的耐热性 1、1/10衰减时间按何热死速度常数 2、热死时间 3、热死温度 4、热阻及相对热阻 现在是5页\一共有72页\编辑于星期六 三、培养基的灭菌 (一)培养基湿热灭菌需解决的工程问题 (1)将培养基中的杂菌总数N0 杀灭到可以接受的总数N(10-3), 需要多高的温度、多长的时间为合理。 现在是6页\一共有72页\编辑于星期六 (2)灭菌温度和时间的确定取决于: ——① 杂菌孢子的热灭死动力学 ——② 反应器的形式和操作方式 ——③ 培养基中有效成分受热破坏的可接受范围 现在是7页\一共有72页\编辑于星期六 (二)微生物的热死灭动力学方程 1、对数残留定律 对数残留定律:实验证明,对培养基进行湿热灭菌时,培养基中微生物受热死亡的速率与残存的微生物数量成正比。即微生物营养细胞的均相热死灭菌动力学符合化学反应的一级反应动力学。即: 现在是8页\一共有72页\编辑于星期六 N:任一时刻的活细菌浓度(个/L) t:时间(s) K:比热死速率常数(s-1) 现在是9页\一共有72页\编辑于星期六 取边界条件t0 = 0,N = N0,对(1)积分得 或 N/N0 即为湿热灭菌中微生物的存活率。 现在是10页\一共有72页\编辑于星期六 2、耐热细菌芽孢的热死模型 菌体相继死亡模型: NR → NS → ND 热死动力学方程: 现在是11页\一共有72页\编辑于星期六 (三)温度对死亡速率的影响 微生物的热死亡动力学接近一级反应动力学,它的比热死亡速率常数K与灭菌温度T的关系可用阿累尼乌斯方程表征: 现在是12页\一共有72页\编辑于星期六 A:频率因子(s-1) ΔE:死亡活化能(J/mol) R:通用气体常数[8.314J/(mol.k)] T:热力学温度(K) 现在是13页\一共有72页\编辑于星期六 上式转换: 现在是14页\一共有72页\编辑于星期六 可以看出: (1)活化能ΔE的大小对K值有重大影响。其它条件相同时,ΔE越高,K越低,热死速率越慢。 (2)不同菌的孢子的热死灭反应ΔE可能各不相同。 将ΔE/R 作为微生物受热死亡时对温度敏感性的度量。 现在是15页\一共有72页\编辑于星期六 培养基中的某些营养
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