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离心技术201209112011级临床本科.pptxVIP

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离心技术201209112011级临床本科第1页/共125页第2页/共125页主讲内容:一、离心原理与技术二、常用标记技术三、其它实验技术第3页/共125页离心原理与技术第4页/共125页离心技术是指利用旋转运动产生的离心力,根据物质的沉降系数或浮力密度的差别进行物质的分析、分离、浓缩和提纯的一种技术。洗衣机的脱水筒“棉花”糖的制作汽车转弯第5页/共125页离心技术是指利用旋转运动产生的离心力,根据物质的沉降系数或浮力密度的差别进行物质的分析、分离、浓缩和提纯的一种技术。应用:分离、纯化样品及对已纯化的样品进行结构和性质分析。第6页/共125页 离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。 它主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开;或将乳浊液中两种密度不同,又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体,例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物;利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点,有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。第7页/共125页 离心技术的应用 1.用于工业生产的,如化工、制药、食品等 工业大型制备用的离心技术,转速都在 每分钟5000转以下。 2.用于生物、医学、化学等实验室分析研究 的,转速从每分钟几千到几万转以上,此 类技术的使用目的在于分离和纯化样品, 以及对纯化的样品有关性能进行研究。第8页/共125页内容:第一节 离心技术的基本原理第二节 离心设备第三节 常用离心方法及应用第9页/共125页第一节 离心技术的基本原理一、离心的一般原理二、离心力和相对离心力三、沉降速度四、沉降系数五、沉降时间六、测定相对分子量第10页/共125页一.基本原理1.离心力 (Centrifugal force,F):是指悬浮颗粒在离心过程中所受的离开旋转中心轴的作用力。 F=ma=mω2r F:离心力(g.cm/s2或达因) m:颗粒质量 a:加速度 ω:旋转角速度 r:旋转体离旋转轴的距离 n:每分钟的转数 ω= (rad/sec) 2πn60第11页/共125页2.相对离心力 Relative centrifugal force (RCF) RCF 就是在离心场中颗粒所受的离心力相当于它受到的地球重力的倍数,称为重力加速度。 RCF=F离心力/F重力 =mω2r/mg=ω2r/g g为重力加速度(980cm/sec2)? 第12页/共125页若用2πn ω= (rad/sec) 60? (2πn/60)2 RCF= x r 980 =1.119×10-5 n2 r n:转子每分钟的转数(rpm) 第13页/共125页RCF= 1.119×10-5 n2 rRCF =1.119×10-5×(12000)2×3.8 =6123gRCF =1.119×10-5×(12000)2×8.1 =13052g第14页/共125页第15页/共125页DoleCotzias制作了转子速度和半径相对应的离心力列线图。第16页/共125页3.沉降速度Sedimentation velocity(1)定义:指在强大离心作用下,单位时间内物质运动的距离。 dx 2r2 (ρp-ρm)V= = . ω2 X dt 9 η d2 (ρp-ρm) = . ω2 X 18ηr: 球形粒子的半径 d:球形粒子的直径η:流体介质的粘度数 ρp:粒子的密度ρm:介质的密度?第17页/共125页?ρp-ρm=0 即ρp=ρm V=0 S=0 粒子平衡?ρp-ρm0 即ρpρm V0 S0 粒子达到某一位置后就达到平衡?ρp-ρm0 即ρpρm1 V0 S0 粒子逆着离心方向上浮第18页/共125页4.沉降系数 Sedimentation coefficient (S) 样品沉降率 样品颗粒的大小 形状 密度 溶剂的粘度、密度 离心加速度 第19页/共125页 在一般情况下,样品的沉降特征可以用沉降系数来表示: S是指单位离心场中粒子移动的速度。? 沉降速度V S= = = 单位离心力ω2 rdx/dtω2 r S在实际应用时常在10-13秒左右,故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位,简写S,量纲为秒。第20页/共125页 5.沉降时间(Sedimentation Time, Ts) dx/dt S= ?2X 1 dx dt= ?2S X 1 lnX2/X1 积分得 t2-t1=· S

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