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一种基于同源序列的核酸拼接方法及其应用。本发明涉及一种将两段或更多双链DNA分子在生物体外有序拼接起来的方法，被拼接的DNA分子相邻末端之间存在一段相同或相近的序列。在一个恒温的反应体系中，核酸外切酶III将DNA分子末端从3’‑5‘水解，在DNA分子的末端产生一段单链区，在碱基配对原则下，相邻DNA分子的单链区由于序列互补而发生杂交，用一种持续合成能力高的DNA聚合酶将杂交产生的空隙补齐，补齐产生的缺刻可以被DNA连接酶修复。这种方法操作简单，只需一步恒温操作即可完成多段DNA分子的高效拼接。
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112175939 A
(43)申请公布日
2021.01.05
(21)申请号 20191
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