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农业活性污泥中微生物分离及生长量检测
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一、实验目的
（1）通过对活性污泥中微生物（主要是细菌） 生长量的检测实验，对微生物菌落形态特征、细菌生长曲线特点及测定原理有所了解。
（2）够熟练使用分光光度计，掌握培养基制备及无菌操作方法、微生物纯种分离，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。
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二、仪器与材料
实验仪器：高压灭菌锅 721分光光度计 比色杯 恒温摇床
实验材料：活性污泥 肉膏蛋白胨培养基（固体和液体） 无菌水
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三、实验原理
采用涂布法将菌液（活性污泥）分散在平板培养基表面，经培养后获得单菌落。
由于细菌菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，本实验采用比浊法，利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，从而了解各菌的生长规律。
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四、实验内容
（1）细菌培养基（固体和液体）的制备及灭菌；
（2）细菌纯种分离；
（3）细菌菌落形态观察；
（4）分光光度计的使用及细菌生长（比浊法）的测定。
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五、实验步骤
LB培养基（固体和液体）的制备及灭菌。
活性污泥中微生物分离
活性污泥梯度稀释
制作平板
灭菌
分装
包扎
称量药品
调pH
溶化
细菌菌落形态观察
37℃恒温培养24小时
涂平板
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五、实验步骤
活性污泥生长量检测
接入
10mL活性污泥
绘制生长曲线
每隔2h测定培养液OD值
37℃振荡培养
100mL液体培养基
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六、实验报告
实验结果
细菌生长量的测定：
细菌生长曲线绘制：
以细菌培养时间为横坐标，以所测得的细菌培养液OD（吸光度）值为纵坐标绘制细菌生长曲线。
分析与讨论
对实验结果与存在的问题进行总结与简要分析。
时间
OD600
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感谢观看！
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