实验十一气相色谱能测定及条件选择方法.pptxVIP

实验十一气相色谱能测定及条件选择方法;;色谱法的起源; 色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。;; 在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相 ；自上而下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ；装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱 。当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。;气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC）; 随着流动相不断加入，洗脱作用连续进行，直至A和B组分先后流出柱子而进入检测器，从而使各组分浓度转变成电信号后记录在记录仪上。 ;关于程序升温 ;单阶程序升温;多阶程序升温;关于塔板理论;tR和W1/2的测量;关于分离度;计算分离度时两峰之差和峰宽测量;氢焰检测器的原理;关于灵敏度和检测限;R ;? ;1.恒温、程序升温对混合样品的分离比较（1）柱温50℃:首先按上述色谱条件接通载气，打开仪器电源开关，设置检测器、汽化室温度，再设置柱温度50℃。待各温度达到设定值后，通入氢气、空气，并为FID点火。同时接通计算机电源，启动色谱工作站。待基线稳定后，取1μl混合样品进样，出峰完毕，停止数据采集，从工作站报告中记录七种物质tR。（2）柱温80℃：将柱温设置为80℃，待基线稳定后，取1μ混合样品进样，停止数据采集后，记录七种物质tR。 ;（3）程序升温：柱温在45℃恒温0.5min后，以10℃/min速率升至80℃，再恒温2min后，结束一个分析周期。设置方法为，先设柱温为45℃，再依次操作：“PRG”键、“▽”键、输入“0.5”、“ENTER”键；“▽” 键、输入“10”、“ENTER” 键；“▽” 键、输入“80”、“ENTER” 键；“▽” 键、输入“2”、“ENTER” 键。进1μl混合样品后，在开始采集数据同时，按动色谱仪“START”键。停止采集后，记录七种物质tR。（4）将程序升温的色谱图放大后，以（mm）为单位，分别测量和记录乙酸乙酯、苯两个峰的峰间距（tR2-tR1）和峰宽（W1、W2）。 ;2.塔板数、灵敏度和检测线的测定（1）在色谱仪上设置柱温为75℃，“RANGE” 输入“9”，“ATT” 输入“3”，待基线稳定之后，启动采集数据，记录5min基线谱图。放大基线谱图，以（mv）为单位估测并记录噪声数（N）。（2）准确取1μl含0.05%苯的甲苯样品进样，记录苯的峰面积并将其单位转换为（mv·s）。（3）将上一步的色谱图适当放大，以（mm）为单位测量并记录苯峰的tR和W1/2。;感谢您的欣赏