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本发明公开了重组人胰岛素前体的酶切转换方法,包括:(1)将初步纯化的重组人胰岛素前体溶液加入缓冲液进行浓度和pH值的调整得到酶切反应底物混合液;(2)向酶切反应底物混合液中加入重组赖氨酰肽内切酶进行重组人胰岛素前体的酶切转换反应。本发明选择重组赖氨酰肽链内切酶作为工具酶,与常用的重组胰蛋白酶相比,单位前体蛋白所需的酶更少,酶切位点单一,酶切过程更高效,使人胰岛素前体的酶切转换效率达到95%以上;在放大酶切时,没有过酶切的顾虑且酶切后获得的目的蛋白纯度更高;重组赖氨酰肽链内切酶酶切最适pH范围离酶
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112625116 A
(43)申请公布日 2021.04.09
(21)申请号 202011607271.5
(22)申请日 2020.12.29
(71)申请人 华润昂德生物药业有限公司
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