人源性胃癌小鼠皮下移植瘤模型建立及传代过程中的遗传忠.docx

人源性胃癌小鼠皮下移植瘤模型建立及传代过程中的遗传忠 一、背景介绍 胃癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，同时也是最具侵袭性和致死性的恶性肿瘤之一。根据世界卫生组织的统计，胃癌每年会导致近百万人死亡，其中约80%的患者来自发展中国家。中国是世界上胃癌高发国家之一，每年新发胃癌患者超过40万，其中多数患者在诊断时已处于晚期，治愈率极低。人源性胃癌动物模型可为胃癌研究提供有力的支持和帮助，因此建立人源性胃癌小鼠皮下移植瘤模型具有重要意义。 二、动物模型建立 1.实验动物 使用裸鼠作为异种移植瘤模型，由于裸鼠缺乏免疫系统，易于形成异种移植瘤。选用BALB/c裸鼠，年龄6-8周，体重18-25g。 2.移植瘤来源 选择人源性胃癌细胞株，如MKN-45、AGS、GC等，培养细胞至对数生长期，收集细胞并根据所需数量进行计数。 3.细胞接种 将收集到的细胞进行离心，弃掉上清液，用PBS洗涤一次，使细胞成为单细胞悬液。将细胞数调整至1x107/ml，按1:1的比例与Matrigel混合。将混合液注射到裸鼠右侧腋窝皮下，在注射后进行对口处理，预防感染。 4.肿瘤生长观察 在移植瘤接种后第7天开始观察是否有肿瘤生长，并测量肿瘤直径。每7天观察一次，直到肿瘤直径达到2.0 cm左右，或裸鼠呈弱、蜷曲、卧位，丧失体重达20%时，停止观察，并进行肿瘤收集。 三、传代过程中的遗传稳定性 传代是指用移植瘤中经培