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本发明公开了一种普适性的mRNA体外环化方法,步骤为:制备纯化的mRNA;对mRNA的5’端进行单磷酸化修饰,并在3’端加上poly(A);将修饰后的mRNA与DNAsplint杂交;向杂交反应体系中加入T4DNA连接酶进行环化;消化体系中多余的DNAsplint,然后对环化产物进行验证;其中所述DNAsplint的长度为60nt,且其5’端为30nt的poly(T),3’端为30nt的可与修饰后的mRNA的5’端互补配对的碱基。本发明的有益效果是:(1)在mRNA的3’端加上了poly(
(19)国家知识产权局
(12)发明专利
(10)授权公告号 CN 112662659 B
(45)授权公告日 2022.08.19
(21)申请号 201910977683.9 (51)Int.Cl.
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