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本发明提供了一种用于NGS平台的尿液外泌体RNA提取和文库构建方法,属于医学和生物技术领域。通过添加助沉试剂到尿液中实现外泌体有效沉降,解决RNA材料受限的问题,同时采用Trizol试剂直接对外泌体进行RNA提取且去除回溶、纯化步骤,减少RNA在提取中损失和降解,为后续建库提供合格原料。通过修复cDNA损伤,优化末端修复加A、纯化步骤,以及文库扩增反应循环数,使用高保真酶预混液进行PCR扩增进行建库,该文库保存了外泌体分子多样性,为NGS技术在液体活检和诊断的应用提供可靠样本。该方法有效解决了尿
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112662739 A
(43)申请公布日 2021.04.16
(21)申请号 202110002459.5
(22)申请日 2021.01.04
(71)申请人 深圳海普洛斯医学检验实验室
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