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负载exosome的树突状细胞诱导抗舌鳞癌效应的研究 背景 树突状细胞(dendritic cells, DCs)是一类免疫细胞，主要在外周组织和淋巴组织中发现。DCs在免疫系统中具有重要作用，能够识别、处理和呈递抗原，并激发T细胞的免疫应答。由于其在肿瘤免疫-编辑中的重要角色，DCs已成为肿瘤免疫治疗的主要对象之一。在过去的几十年中，DCs的多种注射方式、处理方法和抗原类型都被尝试过，然而，目前仍缺少具有可重复性和明确治疗效果的工作流程。因此，DCs的治疗策略必须不断发展和改进，以提高其潜在疗效。exosome，一种直径为30-150 nm的细胞外囊泡，最近被证明可以通过携带肿瘤抗原和激活DCs来诱导肿瘤特异性免疫应答。因此，将exosome与DCs联合使用，可以潜在地发挥协同效应，提高抗肿瘤治疗的效果。 舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma, TSCC)是一种常见的口腔肿瘤，发病率逐年上升。虽然现有的治疗方法可以通过手术、放疗和化疗有效地控制TSCC的生长和扩散，但随之而来的负面影响也限制了其在临床治疗中的广泛应用。因此，寻找新的治疗方式来促进TSCC的生物学治疗是很有必要的。 本研究旨在探究exosome是否能够通过激活树突状细胞诱导抗舌鳞癌效应，为TSCC的治疗提供新的可能性。 材料和方法 1.制备肿瘤来源的exosome 使用舌鳞癌细胞株SCC-4进行培养，并通过浓缩和分离技术制备exosome。exosome的形态学特征和纯度通过透射电镜(TEM)和蛋白电泳进行评价。 2.制备DCs 使用小鼠骨髓细胞培养基进行培养，并加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和肿瘤坏死因子(TNF-a)来诱导DCs的发育。 3.观察exosome对DCs的影响 使用荧光素酶染色法观察exosome对DCs摄取的影响。利用流式细胞术和ELISA测定DCs早期的免疫激活标志物。使用长期培养方法观察exosome与DCs共同存在的影响。 4.观察exosome-DCs的抗肿瘤效应 利用CCK-8细胞存活率实验观察exosome和DCs对SCC-4细胞存活的影响。使用T细胞增殖试验和ELISPOT法评价exosome and DCs对T细胞免疫应答的影响。使用小鼠模型观察exosome和DCs对TSCC的抑制效果。 结果 1.肿瘤来源的exosome可以被DCs有效地摄取，在摄取后，DCs可以表现出早期的免疫激活标志物(CD86，MHC-II)。 2.使用TEM和蛋白电泳技术检测exosome的形态学特征和纯度，结果均满足要求。 3.在长期共存的条件下，exosome可以促进DCs的存活和分化，并表现出免疫相关的特征。 4.使用CCK-8细胞存活率实验表明，exosome和DCs能够协同诱导SCC-4细胞的死亡。T细胞增殖试验和ELISPOT法评价表明，exosome和DCs可以促进T细胞的免疫应答。在小鼠模型中，exosome和DCs可以抑制TSCC的生长和扩散，同时促进小鼠的免疫应答。 结论 本研究发现，将肿瘤来源的exosome与DCs联合使用，可以协同诱导抗TSCC效应。这一结果表明，exosome-DCs治疗策略可以成为一种新的治疗方式，促进TSCC的治疗。本研究为进一步研究利用exosome-DCs治疗TSCC提供了理论依据。