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仿生控释BMP-2和BMP-7的PELA微球支架的研
概述
骨形态发生蛋白(BMP)是一类重要的生长因子,它们在骨组织的形成和修复中起着重要作用。在骨组织工程领域,使用BMPs促进骨再生是一种常见的策略。然而,BMPs的生物活性很容易被环境因素影响,因此需要开发具有控释功能的材料,以确保BMPs能够在适当的时间和地点释放,从而更好地促进骨再生。
本文介绍了一种仿生PELA微球支架,它可以控制释放BMP-2和BMP-7,并通过进行体外细胞实验和动物体内实验评估其生物学功能。该支架能够在适当的时间和地点释放BMP-2和BMP-7,促进骨细胞的扩增和成骨分化,从而具有良好的骨再生效果。
方法
材料制备
由于PCL和PLA聚合物的生物相容性和可降解性,因此它们通常被用于骨组织工程应用中。PCL和PLA均是半结晶聚合物,它们的耐热性和力学性能有所不同。将这两种聚合物按照不同比例混合,可以调节微球支架的降解速率和机械性能。
将PCL和PLA按照1:1的质量比混合,并将混合物溶于二氯甲烷(DCM)中,制备PELA溶液。将溶液注入转速为3000 rpm的离心机的干燥器中,并在60℃的烘箱中干燥12小时,以制备PELA微球。
制备BMPs控释微球支架的方法如下:将PELA微球和BMP-2/BMP-7混合,通过荧光共轭和紫外线测定确定BMP-2/BMP-7的含量,并将混合物溶解于DCM中。将溶液加入到针头连接到喷雾器的注射器中,将喷雾器放置在离心机的干燥器中,并以3000 rpm的转速旋转。旋转过程中,使用氮气吹扫喷雾器,以促进挥发DCM和微球表面的交联。最后,将微球在干燥器中烘干,并使用紫外线灭菌。
生物学功能评估
体外实验
拟合骨母细胞(MC3T3)由ATCC公司提供,在培养基中培养,并分别添加了BMP-2/BMP-7控释微球支架和未添加微球支架的培养基。使用CCK-8检测MC3T3的生存率,并使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测量骨形态蛋白2(BMP-2)、成骨细胞相关基因(ALP、Runx2和OCN)的表达量。
体内实验
将16只SD大鼠随机分入两组:对照组和BMP-2/BMP-7控释微球支架组。使用钛板作为骨缺损支架,将BMP-2/BMP-7控释微球支架放置在缺损部位,对照组仅使用钛板。术后8周,使用X线片和组织学方法评估骨再生情况。
结果
体外实验结果显示,在添加BMP-2/BMP-7控释微球支架的培养基中,MC3T3的生存率和对BMP-2、ALP、Runx2和OCN的表达量显著增加。
体内实验结果显示,BMP-2/BMP-7控释微球支架组的骨缺损部位显示出明显的新生骨形成,而对照组的骨缺损部位显示出显著的髓腔形成。
结论
本研究成功制备了一种能够控制释放BMP-2/BMP-7的PELA微球支架。体外和体内实验结果表明,该支架具有良好的生物学功能,可以促进骨细胞的扩增和成骨分化,并促进骨再生。因此,该支架具有潜力用于骨组织工程领域的治疗和修复。
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