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本发明涉及基因工程领域,具体的说是一种基于ELP‑Intein和ccdB的高效质粒载体及其使用方法。质粒载体为闭合环状的双链DNA,含有ccdB基因做作为负筛选标记,因此该载体能够灵活地进行无背景克隆。同时,该质粒载体含有T7启动子和终止子,并具有ELP‑Intein表达盒,可以高效地表达外源蛋白,还可用基于Intein自我切割的ELP标签和His‑tag标签双纯化法进行蛋白纯化。同时,将基于尿素的变性‑复性循环与基于ELP标签的纯化步骤相结合,可以有效的实现不溶性蛋白的纯化。本质粒载体的灵活克
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112852856 A
(43)申请公布日 2021.05.28
(21)申请号 202110185156.1 C07K 1/22 (2006.01)
(22)申请日 20
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