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本发明公开了无同源性、多个长片段、高效零背景组方法，包括以下步骤：先在整个环化质粒限制性内切酶NotI位点唯一处，添加一个B片段Yesatori，同时保证B片段左右有且刚好只两个NotI酶切位点，示例无同源性的A、B片段之间设计两条Primer1/2引物，无同源性的B、C片段之间设计两条Primer3/4引物以引物作为两个片段之间连接的桥梁；将所有片段共7个ABCDEFG，同每个片段接头处的一对引物共7对primer1‑14，一同转入酵母感受态细胞震荡培养两天；第四步、提取培养两
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112921050 A
(43)申请公布日 2021.06.08
(21)申请号 202110220459.2
(22)申请日 2021.02.26
(71)申请人 通用生物系统（安徽）有限公司
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