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第1页/共33页生物实验检测生物组织中的糖类蛋白质脂肪新人教必修第2页/共33页检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理第3页/共33页生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定必修1第18～19页实验原理试剂鉴定物质实验现象还原性糖 斐林试剂砖红色沉淀橘黄色苏丹Ⅲ脂肪红色苏丹Ⅳ蛋白质 双缩脲试剂紫色淀粉 蓝色 碘 第4页/共33页方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;第5页/共33页第6页/共33页第7页/共33页第8页/共33页实验流程(步骤)1.可溶性还原糖 选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰)，苹果、梨最好 。 制浆：去皮、切块、研磨，制备组织样液：过滤：（用单层纱布）取液：（２mL）显色反应 50～65.C水浴加热2min２mL组织样液刚配制的斐林试剂２mL(用前混匀)变成砖红色现象： 呈现蓝色第9页/共33页还原糖的检测和观察：第10页/共33页还原糖的检测结果第11页/共33页第12页/共33页第13页/共33页脂肪微粒2.脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 ①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 － 3滴，染色２－３min制片：③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色(多余的苏丹Ⅲ )④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒第14页/共33页脂肪的检测结果第15页/共33页第16页/共33页3.蛋白质的鉴定 选材与制备组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］ ２mL组织样液双缩脲试剂Ａ　２mL双缩脲试剂Ｂ３－４滴显色反应(提供Cu2+)(创设碱性条件)现象：无色紫色或紫红色第17页/共33页蛋白质的检测结果第18页/共33页蛋白质的鉴定----双缩脲试剂鸡蛋清溶液 NaOH 溶液滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需摇匀结果显示: 紫色第19页/共33页讨论1.你的预测与实验结果是否一致？2.小组间交流实验结果。你有什么发现？3.全班共检测了多少种生物材料？这些生物 材料中有机化合物的种类、含量一样吗？ 这对我们选择食物有什么启发？第20页/共33页4.淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆检测：碘液2滴２mL组织样液现象： 摇匀后变成蓝色第21页/共33页深化问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。第22页/共33页4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mL新配制的Cu(OH)2溶液先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。水浴加热NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，摇匀。(不能过量)在碱性环境下的Cu2+不需要第23页/共33页5、实验的材料的选择和处理有什么要求？材料的选择材料的处理含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果和梨/还原性糖的鉴定脂肪的鉴定富含脂肪的种子，如花生浸泡3~4小时富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释蛋白质的鉴定/淀粉的鉴定马铃薯第24页/共33页 [例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题： 各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子梨 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定? 。 ②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为 ，你打算用什么试剂鉴定? . 颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂第25页/共33页③小麦种子中糖类化合物 含量很高，却不适合用来鉴定 __________，这是因为 ________________________________________。淀粉 可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水 ④适合于鉴定蛋白质的是