第1章 脑科学研究的方法.pptVIP

穿梭箱实验 自动记录系统可以输出以下内容： (1)动物序号； (2)遭受刺激次数； (3) 遭受刺激时间； (4) 主动回避反应时间。 以上各值均为在设定的穿梭次数内反应的总和。遭受电激次数是被动回避的次数，该值与设定循环次数之差即为主动回避次数；刺激时间是指动物在被动回避过程受到电刺激的时间和，该值愈小，说明动物被动反应愈敏捷，主动回避时间是指动物在接受条件刺激的时间长短，该值越短，说明动物主动回避反应越迅速． 目前六十三页\总数一百一十六页\编于三点 跳台试验 跳台实验属一次性刺激回避反应实验（ONE TRAIL AVOIDANCE TEST）。 装置：试验装置为一长方形反射箱，大小为10cm×10cm×60cm，用黑色塑板分割成5间。地面铺以栅栏，间距0.5cm，可以通电，每间角落置一高和直径均为4.5cm的平台。 目前六十四页\总数一百一十六页\编于三点 跳台试验 原理 在一个开阔的空间，动物大部分时间都在边缘及角落里活动。在一个方形中心设置一个高的平台，当把动物放在平台时，它几乎立即跳下平台并向四周探索接近边缘 指标 潜伏期：记录动物从上平台到第一次下平台的时间 操作步骤 一个典型的例子包含三个过程：熟悉过程 学习过程 记忆检测 熟悉过程：将动物放在平台上，开始计时，至动物跳下。此时间段为潜伏期。动物探索10s以后，放回笼中 学习过程：动物一旦从平台上跳下后，立即受到电刺激，然后放回笼中 记忆检测：学习试验24h后，将实验动物重新放回平台上，记录跳下平台的潜伏期。动物跳下平台或持续停留在平台上标志着验的结束（终止时间为60s）。 将动物放入反应箱内适应环境3min，然后立即通以36V交流电。动物受到电击，其正常反应是跳回平台以躲避伤害性刺激。多数动物可能再次或多次跳至栅栏上，受到电击后又迅速跳回平台。如此训练5min，并记录每鼠受到电击的次数或叫错误次数（number of errors），以此作为学习成绩。24h后重做测试，此即叫记忆保持测试。记录受电击死亡动物数、第一次跳下平台的潜伏期和3min内的错误次数。 目前六十五页\总数一百一十六页\编于三点 三、电生理学方法 电生理学的方法包括胞外记录、胞内记录、脑内电刺激、电压钳、膜片钳、脑电图等技术。 1、电生理常用仪器 ? 阴极射线示波器:高灵敏度，扫描速度慢 ? 生物电放大器 ? 电子刺激器 贮存和分析电生理实验结果的仪器： 如示波器照相机和计算机。 目前六十六页\总数一百一十六页\编于三点 2、电生理学的常用方法 细胞外记录(Extracellular recording)：把引导电极安放在神经组织的表面或附近引导神经组织的电活动。 胞内记录(Intracellular recording)：研究神经元基本生物物理特性的有力手段。EPSP,IPSP,AP(动作电位) 脑内电刺激：是研究中枢功能定位的方法之一。 目前六十七页\总数一百一十六页\编于三点 顺行冲动记录法(Orthodromic impulse recording)：就是电刺激某一突触前的细胞体、树突或轴突，在此突触后神经元细胞体上记录此刺激引起的电活动变化。 逆行冲动记录法(Antidromic impulse recording)：逆行冲动记录法即电刺激神经元的轴突主干或末梢，在同一神经元胞体记录反相传导的动作电位。 目前六十八页\总数一百一十六页\编于三点 电压钳技术(Voltage Clamp)： 通过插入细胞内的一根微电极向细胞内补充电流，补充的电流量正好等于跨膜流出的反向离子流，这样即使膜通透性发生改变时，也能控制膜电位数值的不变。经过离子通道的离子流与经微电极施加的电流方向相反，数量相等。 目前六十九页\总数一百一十六页\编于三点 SG:信号发生器，FBA:反馈放大器，V监测膜电位 目前七十页\总数一百一十六页\编于三点 膜(斑)片钳技术（Patch Clamp）： 可以从分子水平研究细胞膜离子通道的功能，是用玻璃微电极吸管和只含１～３个离子通道，面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来，由于电极尖端与细胞膜的高阻封接，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一极敏感的电流监视器（斑片钳放大器）测量此电流强度，就代表单一离子通道电流。 目前七十一页\总数一百一十六页\编于三点 膜片钳（patch clamp） 内尔(Neher) 萨克曼(Sakmann) （1944-）