蛋白质化学3的学习教案.pptxVIP

蛋白质化学3的学习教案;前言;　　液相色谱技术是根据混合物中溶质在互不相溶的两相间分配行为的差别而引起的移动速度的不同而进行分离的方法。 　　液相色谱分离技术具有分辨率高、设备简单、操作条件温、有利于保持生物大分子的活性等优点。 　　液相色谱因固相介质不同可分为凝胶过滤色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱、亲和色谱、反向色谱、扩张床等。; 凝胶色谱是按照蛋白质分子量大小进行分离的技术，又称之凝胶过滤、分子筛层析或排阻层析。单个凝胶珠本身象“筛子”。不同类型凝胶的筛孔的大小不同。; 如果被分离的样品中各个成分受溶液pH的影响，有时带正电荷，有时带负电荷，此时就可利用离子交换色谱方法进行样品的分离。 离子交换层析的固相是离子交换体，包括离子交换树脂、离子交换纤维素、离子交换葡聚糖。 带有SO3－ 或COO－基团，通常以SO3－Na＋ 或COO－H＋形式出现的叫做阳离子交换基； 带有N＋（C2H5）基团通常以N＋（C2H5）Cl－出现的叫做阴离子交换基。;阳离子交换色谱过程;要记住：蛋白质是由氨基酸聚合形成的聚合物，所以蛋白质也存在等电点（pI），蛋白质在溶液中带电状况同氨基酸相同，取决于所处溶液的pH 值。 当pI pH时，蛋白质带净负电荷；而当 pI pH时，蛋白质带净正电荷。;1.7.５ 疏水作用色谱; 依赖于蛋白