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CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测规范 1、方法 目前用于CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞计数的检测方法分为自动检测方法和手工操作法。自动检测方法包括流式细胞仪（主要有多平台三级程序法和单平台一步法）和专门的细胞计数仪，手工操作法包括几种手工操作试验，需要显微镜或酶联免疫试验设备。 2、实验资料的记录 2.1实验应及时、准确地记录结果。 2.2实验记录中应包括以下内容：日期、操作者、所有样品、实验内容、过程（步骤）、结果及有无事故等。 2.3整个实验室的实验资料要统一有专人负责，按固定格式记录在案。 2.4计算机生成的实验结果，存档备案；定期拷贝计算机结果文档，备案保存。 3、结果报告 3.1按照实验结果填写CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测报告单，检测人员签字。 3.2根据CD命名标准报告数据，用一个简短的描述解释命名的意义。注意：CD4+T细胞是指辅助性T细胞。正确的报告CD4+ T细胞应该是那些CD4+ 和CD3+ 双阳性的细胞。同样地，CD8+ T细胞是T-suppressor/cytotoxic细胞，为CD3+ 和CD8+ 双阳性的细胞。在CD4+ 和CD8+ 的判定中重要的是排除其它细胞（非T细胞）的干扰。 3.3以全部淋巴细胞的百分比报告数据，并且修正门内淋巴细胞纯度。例如，如果淋巴细胞纯度是94%，而CD3值为70%，可以通过0.7除以0.94乘以100得到74%，修正CD3的值。 3.4为检测免疫亚群而取血的同时，用该血样作自动测定全血细胞（CBC）计数白细胞（WBC）及分类测定，报告淋巴细胞亚群绝对数值。 3.4.1用淋巴细胞的总数（来自于WBC及分类）乘以淋巴细胞亚群的百分率（从流式细胞仪的数据中得到），计算绝对数值。 3.4.2如可能，应报告计数的百分率和绝对值。 3.5单平台一步法由计算机软件直接出结果并打印出报告单，报告单的内容包括如下结果：CD45+ Abs Cnt；CD3+ Abs Cnt；CD3+ CD4+ %T Lym；CD3+CD4+ Abs Cnt；CD3+CD8+ %T Lym；CD3+CD8+ Abs Cnt；Th/Ts及其正常参考值范围(BD公司建立的正常参考值范围见 表3)，检测人员签字。 表3 BD公司应用单平台一步法建立的正常参考值范围表 项 目 单 位 参考正常值范围 CD3+/ CD45+ % 56%?85% CD3+绝对数 个/μl 1027?2086 CD3++ CD8+/ CD45+ % 15%?34% CD3++ CD8+绝对数 个/μl 323?836 CD3++ CD4+/ CD45+ % 30%?54% CD3++ CD4+绝对数 个/μl 706?1125 CD4+/ CD8+比值 1?2* *另有报告： ①0.68-2.47（中华检验医学杂志，2003，26（2）：123-125） ②0.71-2.87（中华检验医学杂志，1998，21（4）：223-227） ③1.38±0.34(中华检验医学杂志，1998，21（2）：98) 3.6 应报告所有相关数据的正常值范围（如CD4＋T淋巴细胞百分率和绝对数）。每个实验室都应测定参考数值。应分别建立成人和儿童的正常值参考范围，在对病人样品检测时应使用合适的参考值。 3.7报告单经复核人复核签字及签发，加盖检验专用公章后发出。 3.8报告发放时，可经挂号邮寄或直接交给送检人。 4、质量控制和评价 制定质量保证计划，建立内部质量控制制度。参加室间质量评价。正常参考数据见7.5。 5、检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞的意义 T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一群细胞。在正常机体内各淋巴细胞亚群相互作用，维持着机体正常免疫功能。当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，可导致机体免疫功能紊乱并发生一系列病理变化。因此，Ｔ淋巴细胞亚群的免疫分型能够提供有关患者免疫状态的重要信息。AIDS是由HIV引起的一组综合征，HIV主要侵犯人CD4+ T淋巴细胞，导致其数量上的减少和功能缺陷，使机体免疫平衡被打破造成 免疫功能低下，最终导致各种机会感染和肿瘤。因而，对HIV感染者和AIDS病人定期进行CD4+、CD8+T淋巴细胞 检测具有十分重要的意义。主要表现在以下几个方面： 5.1了解机体的免疫状态以进行疾病分期，如美国CDC就是以此为基础制订了HIV感染者/AIDS病人的诊断和分类标准（见表4），目前国内外仍被采纳应用。 表4 1993年修订的HIV感染的分类系统和青少年及 成人扩展的AIDS监测病例定义 CD4+T淋巴细胞数范围 临床分类 A 无症状，急性（原发）HIV或PGL B 有症状，非（A）或（C） C 艾滋病指征性疾病 1．≥500/μl （≥29%） A1 B1 C1 2．200~499/μ