2 坐骨神经-腓肠肌标本的制备.pdfVIP

坐骨神经-腓肠肌标本制备 [实验目的] 1、学习生理学实验基本的组织分离技术； 2、学习和掌握制备蛙类坐骨神经腓肠肌标本的方法；- 3、了解刺激的种类。 [实验原理] 两栖类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，在生理 学实验中常利用蛙的坐骨神经 腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋性- 及兴奋的传导、传递过程；肌肉的收缩特性以及刺激与肌肉收缩反应 的规律等。 两栖类离体组织所需的生活条件比较简单，易于建立、控制和掌 握。所以蛙的坐骨神经 腓肠肌标本的制备是生理实验的一项基本操- 作技术。 坐骨神经 腓肠肌的生理：给神经纤维一次适宜刺激，可在神经- 纤维产生一个动作电位，传导至神经肌肉接头处，传递至肌纤维并引 起肌纤维兴奋，随后肌肉发生一次收缩和舒张。 [实验对象 蟾蜍或蛙] [实验药品 任氏液] [仪器与器械] 普通剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针 （解剖针）、玻璃分针、蛙板、 蛙钉、细线、培养皿、滴管、锌铜弓。 [实验方法与步骤] 1、双毁髓处死青蛙 取青蛙一只，用自来水冲洗干净 （勿用手搓）。 左手握住青蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯 （以头 颅后缘稍稍拱起为宜）。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺 2 3 入椎管。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针 ～ 次，捣 毁脑组织。探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。 再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入 椎管，捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是， 进针时有一定的阻力，而且随着进针青蛙出现下肢僵直或尿失禁现 象。 若脑和脊髓破坏完全，青蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软， 失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如青蛙仍有 反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。 2、剪除躯干上部、皮肤及内脏 用左手捏住青蛙的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窝处剪断脊柱， 然后将粗剪刀尖向下深入体腔沿躯干两侧剪开皮肤，使青蛙头、上肢 与内脏自然下垂，将其一并剪除弃去，仅留后肢、骶骨、脊柱及紧贴 于脊柱两侧的坐骨神经。在整个剪除过程中注意勿损伤神经。 3、剥掉后肢皮肤 一只手捏住脊柱断端 （注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只 手捏住其皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢皮肤。将标本放在盛有任 氏液的平皿中。将手及用过的粗剪刀、组织镊等全部手术器械洗净。 4、分离两后腿 用镊子取出标本，左手捏住脊柱断端，然后沿正中线用粗剪刀将 脊柱分为两半，并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，然后将分离的两条 腿浸于盛有任氏液的平皿中备用。 注意，勿伤坐骨神经( ) 5、制作坐骨神经腓肠肌标本- 7 8 9 蛙类的坐骨神经是由第 、、 对脊神经从相对应的椎间孔穿出 汇合而成，行走于脊柱的两侧，到尾端 （肛门处）绕过坐骨联合，到 达后肢背侧，行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟 内，到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌。 1 （）游离坐骨神经和腓肠肌 取一腿放于蛙板上，脊柱端腹面朝上、后肢背面朝上，用蛙钉将 标本固定。用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经，然后在后肢于股二头肌 与半膜肌的肌缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离，直到腘窝，不 要伤及神经。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在其 跟腱处穿线、结扎。 2 - （）完成坐骨神经 小腿标本 2 3 将标本腹面向上，将坐骨神经连同 ～ 节脊椎用粗剪刀从脊柱 上剪下来。再将标本背面向上，用镊子轻轻提起脊椎，自上而下剪去 支配腓肠肌以外的神经分支，直至腘窝，并搭放在腓肠肌上。沿膝关 节剪去股骨周围的肌肉，并将股骨刮净，用粗剪刀剪去股骨上端的 1/3 2/3 - （保留 ），制成坐骨神经 小腿标本。 3 （）完成坐骨神经腓肠肌标本 将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下，提起腓肠肌的结扎线剪断跟 腱。用粗剪剪去膝关