摇床对细胞培养条件造成影响分析！.docx

来源：“Eppendorf实验室”公众号原标题：让悬浮细胞培养1+12的秘诀是…… 当我们在进行重组蛋白表达或生物反应器起始培养物（接种物）的生产时，哺乳动物细胞悬浮培养是非常重要的一环。 影响细胞培养的因素非常多，为了优化细胞生产条件，需要控制培养基的温度和?pH 值，还需要持其体积，以避免代谢物、钠离子等浓度的显著变化而造成不利影响。 图 1：进行哺乳动物细胞悬浮培养的摇瓶 例如，哺乳动物细胞悬浮培养大多需要在摇瓶中进行，但是摇瓶在震荡过程中，会增加培养基的蒸发，产生体积变化，所以尤其需要注意。 当细胞在培养过程中，摇瓶、摇床和 培养箱都会对培养环境造成影响，所以优化培养环境需贯穿始终。 适当的培养条件由具有高相对湿度（RH%）的富含?CO2?的气体环境提供，这就需要有专门的设备来控制并维持。 今天小 编 就从一些容易忽视的细节出发，来聊一聊摇床对细胞培养条件会造成的影响。 图 2：在 CO2 培养箱内放置摇床进行悬浮细胞培养 01 摇床的散热量 在 CO2?培养箱中使用摇床会给培养箱环境带来额外的热量。由于 CO2?培养箱是隔热的，通常缺乏主动冷却功能，这种额外的热量可能会破坏 CO2?保温箱的温度控制。高于生理温度仅 1℃ 的升温会对细胞生长产生不利影响。 02 摇床的重量和震动 如果?CO2?培养箱同时在培养贴壁细胞，由于摇床的重量很容易超过搁板支架的负载（通常在 10 kg 的范围内），因此可能会发生搁板弯曲，从而导致培养皿/瓶的倾斜，贴壁细胞的培养基条件就会发生差异。除此之外，摇床运行造成的震动也会干扰箱内其他细胞生长，如对震动敏感的细胞如干细胞或原代细胞。 03 摇床造成的污染隐患 预防污染对于避免细胞样品损失、重复进行实验以及处理污染造成额外的成本显得尤为重要。高温消毒已成为 CO2?培养箱防污染的重要措施。因此，理想情况下，摇床应在箱内同时进行高温消毒（120–180°C）。 但目前市场上还没有一款摇床能够完全耐受高温，所以在对?CO2?培养箱进行消毒之前，需要将其移除。当重新放置摇床的时候，就会产生引入污染的风险。 图 3：建议在 CO2 培养箱内测试摇床的性能，以确保其不会产生冷凝水而增加污染风险 在 培养箱?内放置摇床不仅会对细胞培养条件产生影响，而且培养箱内温暖、高湿（相对湿度约 95%）和微酸性的环境对摇床来说是一个严苛的工作环境，尤其是在腐蚀方面，这对摇床的使用寿命来说也是一个很大的考验。 说明：转载仅为分享目的,部分文章图片因转载众多无法确认原始作者的,仅标明转载来源;版权归原作者所有,如有问题,请联系小编删除,谢谢！