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动物实验操作;大鼠生物学特性;动物实验基本技能;一、编号与标记方法;;涂染原则:从左到右、从上到下
左前肢为1号、左侧腹部2号、左后肢3号,
两耳后部4号、背部5号、后肢背部6号,
右前肢7号、右侧腹部 8号、右后肢9号
头部为40号、尾巴根为10号。;在每组动物不超过100只的情况下适用
实验动物:大鼠、小鼠
常用染色剂:3-5%苦味酸溶液,可染成黄色,作为“个”位数
常用染色剂:0.5%中性红或品红溶液,可染成红色,作为“十”位数;用两种颜色同时进行染色标记
用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,个位数的染色标记方法同单色涂染法
用品红(红色)染色标记作为十位数;左前肢为10号、 左侧腹部20号、左后肢30号
两耳后部40号、 背部50号、 后肢背部60号
右前肢70号、右侧腹部 80号、右后肢90号
第100号不作染色标记;穿耳孔法:用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法。原则是:左耳代表十位,右耳代表个位。实验动物:兔、犬、猪
标牌法:一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上。实验动物:犬、猴
烙印法
剪毛法;器材:大鼠饲养盒 + 面罩 1套
方法步骤:
首先戴好防护手套
用右手拇指和食指抓住小鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上
左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行
以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤,完成抓取固定;动物全身麻醉分四期:
第一期:随意兴奋期,出现运动与运动失调
第二期:不随意兴奋期,由意识完全丧失至规则的自动呼吸开始时止
第三期:外科麻醉期
第四期:延髓麻醉期,进入此期,麻醉已严重过量;麻醉方法:全身麻醉和局部麻醉,通过吸入、注射(静脉、皮下、肌肉、腹腔)、口服、灌胃等方法使动物麻醉
常用麻醉药物:乙醚(吸入),戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮(静脉),普鲁卡因、利多卡因(局麻);种类;麻醉前应禁食8h以上
麻醉前应准确称体重
注意麻醉剂量
麻醉过程中注意观察动物的反应情况
注意保温
静脉注射时必须缓慢,
在寒冷冬季,麻醉剂在注射前应加热至动物??温水平;原理:是使用非挥发性麻醉药对动物进行全麻术的方法
器材:3%戊巴比妥钠、注射器;用左手将大鼠捉持保定,使鼠腹部朝上,鼠头略低于尾部
右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺
针头刺入皮下后进针3mm左右,接着使注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失
固定针头,保持针尖不动,回抽针栓,如无回血、肠液和尿液后即可注射药液;经口给药
注射给药
1.皮下注射给药
2.皮内注射给药
3.肌肉注射给药
4.静脉注射给药
5.腹腔注射给药;自动口服给药
灌胃给药:是借器械将药物直接灌入动物胃内的方法,此法可以准确控制给药量,但如果操作不当易造成动物死亡;将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液
操作前,大致量一下从口到胃的距离,估计灌胃针头插入的深度
左手捉持动物,使头部向上;右手持针,把灌胃针头的前端放进动物的口腔,顺着上腭部插入咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入动物的胃内,此时没有抵触感
用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入动物的胃中;剂量:小鼠约0.1-0.5ml/10g体重,最大体积为1.0ml/只;大鼠约1-2 ml/100g体重,最大体积为1.0ml/只
注意:在灌胃过程中,避免误插入气管
;1.皮下注射给药
原理:将药液注入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环
器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球;注射部位:颈背部、腋下、腹侧和后肢的皮下
常规消毒注射部位的皮肤,用注射针头取一锐角角度刺入皮下.
将针头轻轻向左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将药物注入皮下。
注射量:0.01ml—0.03ml/g体重;此法用于观察皮肤血管通透性变化或皮肤反应
注射部位:动物背部,脱毛,用针头平直进入皮内
注射药液后,皮肤表面鼓起小泡,停片刻拔出针头;原理:将药液注入动物的肌肉组织,经毛细血管吸收进入血液循环
器材:1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球
注射部位:一般选择肌肉丰富而无大血管通过的臀部或大腿外测,回抽无血即可注射;原理:将药液注入小鼠的尾静脉
器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、金属笼或大小鼠器 、酒精、碘酒、棉球 ;将大小鼠放在金属笼或小鼠固定器中,通过金属笼或大小鼠固定器的孔拉出鼠尾巴
用左手捏住鼠尾巴中下部,用75%酒精棉球反复擦拭尾部;注射时,以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧,用食指从下面托
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