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本发明公开了一种高通量CRISPR基因编辑工具载体构建方法,包括如下步骤:S1、引物设计及合成;S2、引物退火;S3、sgRNA重组质粒构建;S4、转化得到24份2μl的混合物;S5、筛选单克隆;S6、质粒提取及测序。该方法优化了重组质粒的构建步骤和转化实验的孵育步骤,同时缩短了质粒构建和转化实验的时间提高了转化效率和阳性率,减少了实验成本,在筛选单克隆过程中替换了传统的涂布棒法,为最终实现自动化、高通量sgRNA载体构建奠定了基础;解决了酶切和连接的矛盾,将不可能统一的体系实现了统一,该方法不
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 113736788 A
(43)申请公布日 2021.12.03
(21)申请号 202111126765.6
(22)申请日 2021.09.19
(71)申请人 宁夏
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