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神经干复合动作电位的记录和观察
课程名称:动物生理学实验
[目的]
1、学习电生理学实验方法。
2、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形,并了解其产生原理。3、
测量神经干动作电位产生的阈强度和顶强度。[原理]
1、两栖类一些基本的生命活动和生理功能与温血动物类似,而离体
组织器官所需的生活条件比较简单,并且易于控制和掌握,因此在生理实
验中常用两栖类离体组织器官作为实验标本。
2、神经干在受到有效刺激后,可以产生动作电位,标志着神经发生
兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动,可以引导出双相的动作
电位,如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏,则引导出的动作电位即
为单相动作电位。
3、神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是
由很多不同类型的神经纤维组成的,所以,神经干的动作电位是复合动作
电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随着刺激强度的变化而变
化的。
[实验材料]蛙常用手术器械蛙板任氏液培养皿烧杯神经屏蔽盒
Medlab生物信号采集系统
[实验流程]神经干标本制备→仪器联接和调试→测定参数→测定神经
干的刺激阈值→观察记录双相动作电位→观察记录单相动作电位[实验步
骤]一、蛙坐骨神经干标本制备1.毁脑、脊髓。
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2.去躯干上部及内脏和皮肤将前半躯干、皮肤和内脏一并拉剥弃之,
仅保留一段腰背部脊柱及两后肢,并将其放入盛有任氏液的培养皿中。
3.洗净手和所用过的用具,以防沾染标本。
4.平分标本沿脊柱正中线至耻骨联合中央将标本分为两半。放入任
氏液中。
5.游离坐骨神经任取一标本,用玻璃分针游离坐骨神经腹腔段。然
后换至背侧向上,持玻璃分针沿坐骨神经沟(股二头肌及半膜肌肌间沟)
小心分离坐骨神经大腿段,用剪刀剪去神经干上各细小分支(切忌撕扯)。
坐骨神经下行至腘窝处分为两支:内侧为胫神经,走行表浅;外侧为腓神
经。沿胫、腓神经走向分离至踝部,尽量将神经干标本剥离长一些,要求
上自脊神经发出部位,下沿腓神经与胫神经一直分离到踝关节附近,剪断
侧支。尽量将神经干周围的组织剔除干净(剥离时切勿损伤神经干),结扎
坐骨神经干的脊柱端及胫、腓神经的足端,游离神经干。
6、将坐骨神经干标本浸入任氏液中5分钟,以稳定其兴奋性。二、
仪器联接和调试
打开Medlab生物信号采集系统软件,选通道1作为记录信号的通道,
选通道4用于刺激信号的监视通道 (应用Q9三通将刺激输出分成两路,
一路用于刺激标本,一路输入4通道)并用高阻抗导线将通道输入口与神
经屏蔽盒的引导电极相连,用刺激导线将Medlab 的刺激信号输出口与神
经屏蔽盒的刺激电极相连。将神经屏蔽盒内所有电极用浸有任氏液的棉球
擦净。用镊子夹住已制备好的神经标本的一端,将其放置于电极上(脊椎
端位于刺激电极
方向),用滤纸片吸去标本上过多的任氏液。
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神经干动作电位观察和记录的仪器连接
三、动作电位的观察和记录1.测定参数
采样参数显示方式采样间隔某轴显示压缩比通道数通道DC/AC处理名
称放大倍数
刺激器参数主周期刺激主周期1波宽0.1m幅度1V间隔50m脉冲数1
延时10m 自动幅度调节主周期1波宽0.1、0.5、2.0m首幅度0V增量
0.02V截至幅度2V脉冲数1延时10m通道1AC神经干AP200-1000示波器
20μ2:12通道4DC刺激信号202.实时调节Medlab生物信号采集系统和
刺激器的延迟,使动作电位波形正好出现在显
示屏的适中位置。同时调节刺激强度求出在相应刺激波宽下动作电位
产生的阈强度和顶强度。
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