2019教育《微生物的实验室培养》的教学设计.pdfVIP

《微生物的实验室培养》的教学设计 一、教学目标 1、知识目标：了解有关培养基的基础知识 2、能力目标：掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术 3、情感目标：养成勇于实践、严谨求实的科学态度 二、教学重点、难点 无菌操作技术 三、教学过程 1、配制微生物培养基 向学生提供几种微生物培养基的配方，让学生通过比较分析各种配养基配方，明 确微生物培养基的基本成分包括：碳源、氮源、无机盐和水，有些微生物 还需要某些 特殊的生长因子。 计算：根据配方比例，计算100mL牛肉膏蛋白胨固体培养基各成分用量。 称量 ：准 确称取各成分。 溶化：加水加热熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化钠继续加热；加入琼脂；用蒸馏 水定 容到 100mL整个过程不断用玻棒搅拌（防止琼脂糊底而导致烧杯破裂） 调pH:用 1mol/LNaOH容液调节pH至偏碱性。 灭菌 ：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所 用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。 °C 倒平板：待培养基冷却至50 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。在火焰旁右手拿 锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；左 手将培养 皿打开一条缝隙， 右手将培养基倒入培养皿， 立刻盖上皿盖。 待平板冷 却凝固后， 将平板倒过来放置。 2、无菌接种 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作， 将聚集的菌种逐步稀释 分 散到培养基表面。 将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 在酒精灯火焰旁冷 却接 种环， 并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 将菌种试管口通过火焰达到消灭 试管口 杂菌的目的。 将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。 将菌种试管口 再次通过 火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划 3 5 条平行线，盖上皿盖（不要划破培养基）。灼烧接种环，冷却后从第一区划线末 端开 始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不 要将第五 区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。 还可以用涂布法接种： 将菌液进行一系列梯度稀释， 并将不同稀释度菌液分 别 涂布到琼脂固体培养基上进行培养。 当稀释倍数足够高时， 即可获得单个细菌 形成 的标准菌落。 3 、培养观察 C 将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入 37 的恒温箱中，培养，在 12小 时和 24 小时后，分别观察和记录结果。可安排生物课代表或小组长进行定 期观察， 并做好计录，以便及时让其他学生观察到自己的实验成果。