食品中还原糖的测定-直接滴定法.pptx

液相色谱仪的使用滴定法食品中还原糖的测定 —直接滴定法 基础知识什么是还原糖？具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离半缩醛羟基的双糖都具有还原性 还原糖：葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖还原糖的测定方法是一般糖类定量的基础 还原糖一般糖类测定方法定量的基础GB 5009.7-2016本标准第一法、第二法适用于食品中还原糖含量的测定。本标准第三法适用于小麦粉中还原糖含量的测定。本标准第四法适用于甜菜块根中还原糖含量的测定。 直接滴定法高锰酸钾滴定法铁氰化钾法奥氏试剂滴定法 直接滴定法测定还原糖 主要内容1234食品中还原糖含量的测定——直接滴定法测定方法测定原理主要仪器、试剂结果计算及判定 已用还原糖标准溶液标定在加热条件下滴定标定过碱性酒石酸铜溶液试 样除去蛋白质亚甲蓝作指示剂样品液消耗体积计算还原糖含量一、测定原理 二、仪器、试剂（一）主要仪器25mL酸式滴定管可调电磁炉分析天平锥形瓶、容量瓶、移液管、量筒、漏斗、烧杯等 二、仪器、试剂1.0mg/mL葡萄糖标准溶液：标定碱性酒石酸铜溶液(二）试剂澄清剂，沉淀蛋白质乙酸锌溶液亚铁氰化钾溶液 碱性酒石酸铜甲液：(15.00g无水硫酸铜+0.05g次甲基蓝→1000mL)二、仪器、试剂(二）试剂注：甲液和乙液应分别贮存，用时等体积混合，否则酒石酸铜溶液长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。碱性酒石酸铜乙液：(50.00g酒石酸钾钠+75.00g氢氧化钠溶解后+4g亚铁氰化钾→1000mL) 二、仪器、试剂碱性酒石酸铜溶液是还原糖定量的关键试剂，它如何对还原糖进行测定的呢？碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合后，在加热条件下，用还原糖标准溶液进行滴定，试液中的还原糖与二价铜离子发生氧化还原反应，生成红色的氧化亚铜沉淀此沉淀随即被溶液内的亚铁氰化钾络合生成无色可溶的络合物待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把亚甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点记录还原糖标准溶液的消耗体积，即可得到一定量碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量由于碱性酒石酸铜溶液和还原糖的反应是定量进行的，固定碱性酒石酸铜溶液的量不变，同样操作条件下，用处理后的试样溶液来滴定碱性酒石酸铜溶液，记录试样溶液的消耗体积即可计算出还原糖的含量 二、仪器、试剂碱性酒石酸铜溶液是如何对还原糖进行测定的呢？甲液、乙液等体积混合蓝色碱性酒石酸铜溶液红色氧化亚铜沉淀 还原糖Cu2+被亚铁氰化钾络合成无色可溶态亚甲基蓝 三、样品的测定方法碱性酒石酸铜溶液的标定试样制备试样溶液预测试样溶液测定 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定45℃热水提取1h后加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液 沉淀蛋白质（1）淀粉类样品定容后过滤 收集滤液用以测定粉碎或混匀后称取适量 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定在水浴上蒸发 至原体积的1/3~1/4（2）酒精饮料先调节样品溶液至中性以除去酒精和CO2进行澄清测定 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定（3）碳酸饮料称取适量水浴上微热搅拌去除CO2直接定容测定 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定（4）其他食品粉碎或混匀后称取适量直接加水和澄清剂定容后过滤 收集滤液用以测定 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定香醋样品：移取10mL混合均匀后的试样→移入250mL容量瓶中→加水50mL→慢慢加入5mL乙酸锌溶液和5mL亚铁氰化钾溶液→加水至刻度→混匀→静置30min →干燥滤纸过滤→弃去初滤液20～30mL →滤液备用 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定碱性酒石酸铜溶液的标定吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5.0mL，150mL锥形瓶中, 加水10mL加玻璃珠3粒从滴定管中加葡萄糖标准溶液约9mL 加热使其2分钟内沸腾，趁热以1d/2s的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积要求：平行操作3份，取其平均值 三、样品的测定方法试样制备试样溶液预测试样溶液测定碱性酒石酸铜溶液的标定计算每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）m1=V×cM1表示标定消耗葡萄糖标准溶液的