DB32T3991-2021‘紫金四季’草莓组培快繁技术规程.pdfVIP

ICS 65.020.20 B 31 DB32 江 苏 省 地 方 标 准 DB32/T 3991—2021 ‘紫金四季’草莓组培快繁技术规程 Technical regulation for micropropagation of everbearing strawberry ‘Zijin Siji’ 2021 - 02 - 03 发布 2021 - 03 - 03 实施 江苏省市场监督管理局 发 布 DB32/T 3991-2021 ‘紫金四季’草莓组培快繁技术规程 1 范围 本文件规定了 ‘紫金四季’草莓组培快繁技术规程的培养基配制、植株选择与外植体处理、培养技 术、种苗培育技术要求。 本文件适用于 ‘紫金四季’草莓组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 600 1 育苗技术规程 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 NY/T 3032 草莓脱毒种苗生产技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 培养基配制 4.1 基本培养基与植物生长调节物质母液 B 、MS基本培养基购自商业化产品，培养基中大量元素、微量元素、铁盐、有机成分组成参见NY/T 5 2306 。 植物生长调节物质母液配制的浓度、方法、保存参见NY/T 2306 。 4.2 培养基配方 培养基配方如下： 诱导培养基：B5 固体培养基+6-BA 3.4 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L~7 g/L ； 伸长培养基：MS 固体培养基+6-BA 1.7 mg/L+IBA 0.15 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L~7 g/L； 增殖培养基：MS 固体培养基+6-BA 0.75 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L~7 g/L； 生根培养基：1/2MS 固体培养基+IBA 0.003 mg/L+葡萄糖1.0%+琼脂6 g/L~7 g/L。 4.3 培养基配制与消毒灭菌 培养基准备、糖溶解、琼脂溶化、定容、pH 测定、分装、封口、灭菌、冷却、贮存等均参见NY/T 2306 。 1 DB32/T 3991-2021 5 植株选择与外植体处理 5.1 植株选择 在6月~ 10月，选择种植在栽培介质（土、基质等）未发生病虫害、植株长势强、营养生长期在100 d 以上、根颈部粗 1 cm、叶片颜色深绿色的草莓植株作为取材对象。 5.2 外植体处理 5.2.1 洗涤剂处理 匍匐茎或根颈在碱性洗涤剂中浸泡20 min~40 min ，流水冲洗30 min~60 min ，蒸馏水清洗2次~3次， 转至超净工作台。 5.2.2 消毒 在超净工作台上，匍匐茎或根颈用75%乙醇浸泡15 s，无菌水冲洗4 次~6 次。 剥开匍匐茎顶端叶片或根颈处，选取匍匐茎茎尖或1 mm 隐芽，0.8%次氯酸钠溶液消毒（匍匐茎 茎尖处理15 min, 隐芽处理10 min）；无菌水冲洗4 次~6 次，无菌滤纸吸干；置入无菌培养皿中用无 菌刀片切割，匍匐茎茎尖生长点取0.2 mm~0.8 mm ，隐芽取0.5 mm~3 mm ；若超出尺寸范围，45°斜切。 6 培养技术