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- 2023-07-23 发布于广东
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第一页,共二十九页,2022年,8月28日 转基因技术 将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中,由于导入基因的表达,引起生物体的性状的可遗传的修饰,这一技术称之为转基因技术(Transgene technology)。 第二页,共二十九页,2022年,8月28日 技术路线 目的基因分离 植物表达载体的构建 受体材料的准备 遗传转化 转化组织 组织脱分化 转化植株筛选 炼苗 第三页,共二十九页,2022年,8月28日 1.目的基因的分离 (1)已知基因的获得 ①化学合成法 ②PCR扩增 (2)未知基因的获得 ①构建基因组文库,筛选目的基因 ②构建cDNA文库,筛选目的基因 ③mRNA差异显示技术筛选差异表达基因 ④差异蛋白质谱表达技术筛选功能基因 …… 第四页,共二十九页,2022年,8月28日 ① ② pGEM-T ③ ④ ⑤ ⑥ ⑥ ⑦ ⑧ ①银杏叶RNA提取 ②反转录cDNA ③chs全长cDNA的克隆 ④TA克隆及测序 ⑤向chs两端引入酶切位点 ⑥双酶切 ⑦定向克隆 ⑧导入农杆菌 2.植物表达载体的构建 第五页,共二十九页,2022年,8月28日 3.受体材料的准备 细胞的全能性:分化细胞脱分化 再分化 第六页,共二十九页,2022年,8月28日 4.遗传转化 (1)间接转化法——农杆菌介导转化法 (2)直接转化法 A、 基因
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