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Sheet3
Sheet2
Sheet1
实时荧光定量PCR仪比较表
ABI, Prism 7500
ABI Step One/Plus
Stratagene Mx3000P
Stratagene Mx3005P
Bio-Rad CFX96
Eppendorf:2 / 4 Color Systems
Rotor-Gene 6000
Roche LightCycler 1.5/2.0
Roche LC480
简 评
光源
卤钨灯
蓝光LED
石英卤钨灯
6个LED
96个蓝光LED
LED
1个LED
氙灯
卤钨灯激发范围宽广,光强强,非常适合做多通道的定量PCR,LED的激发光源是冷光源相对 寿命相对也要长,但是光强度低,光的激发范围受限制,氙灯波普偏窄。
通道
5通道其中一个为校正染料通道
3通道
4 通道
5通道
2/4通道
2、4、5、6不等
3块检测滤光片/6块检测滤光片
五通道
多通道是定量PCR发展的趋势,现在多通道的荧光定量实验也越来越多,主流的是4通道
检测器
冷CCD
光电二极管
PMT
PMT
6个光电二极管
1/2个PMT
CCD
采用CCD检测器具有边缘效应,做实验时必须加入校正染料。采用PMT检测器,能将光信号放大,检测灵敏度高,无需校正染料。发光二极管的检测灵敏度低。
滤光系统
5个激发光滤镜与5个发射光滤镜
带有3个/4个检测端滤光片
4个激发光滤镜与4个发射光滤镜
6个激发与6个检测
激发端没有滤光片发射端有2/4个滤光片
检测滤镜片
3个/6个发射光检测滤光镜
5个激发端滤光片和6个检测断滤光片
激发光与发射光的双重过滤能排除杂光的影响,从而提高检测的准确性
样品通量
96孔
48孔/96孔
96孔
36/72/100
96/384
96孔通量高,可以采用多孔板方便操作。
激发光范围
400-660nm
470nm
350-750nm
450-730 nm
365nm/470nm/530nm/585nm/625nm/680nm/460nm
430-630nm
Stratagene扩大了光谱的检测范围,从350-750nm。目前市场上所有的荧光探针都适用。优化的4通道能减少各通道光谱之间的相互干扰。
检测光范围
500-660nm
350-700nm
460nm/510nm/555nm/610nm/660nm
530, 640 ,705nm/ 530, 560,610,640 ,670,705nm
Stratagene检测光范围最宽广
可用荧光染料
FAM?/SYBR? Green I,VIC?/JOE?,NED/TAMRA?/CY3,和ROX? CY5
FAM?/SYBR? Green, VIC?/JOE?, and ROX?
ALEXA Fluor? 350 (350nm-440nm), FAM?/SYBR? Green I (492nm-516nm), TET (517nm-538nm), HEX?/JOE?/VIC? (535nm-555nm), Cy3? (545nm-568nm), TAMRA? (556nm-580nm), ROX?/Texas Red? (585nm-610nm), and Cy5? (635nm-665nm).
没有明确注明可用染料,SybrGreen I可用
SYBR?Green, FAM, VIC, TET, HEX, ROX, JOE, TAMRA
FAM?/SYBR? Green I,TET,HEX VIC?/JOE,/TAMRA?/CY3,Texas Red和ROX? CY5
FAM/SYB,LC610.LC710(2.0增加HEX ,JOE,640,670)
LightCycler?Cyan 500/ SYBR Green I/ FAM/ HEC(VIC)/ LightCycler?Red 610/ LightCycler?Red 640/ Cy5
Stratagene的可用染料最多,开放性最好
检测动态范围
9个
9个
10个
10个
宽广的动态范围有利于摸索实验条件
温度均一性
(+/-)0.5
± 0.5 °C
(+/-)0 .25
±0.4°C
± 0.4 °C
+/-0.01
(+/-)0.4
(+/-)0 .35
Stratagene改进了传统的模块加热方式,使得温度非常均匀,实验的重复性更好
升降温速度
样品:1.6度/秒,模块:2.5度/秒
模块最高4.6度/秒,样品快速功能下2.2度/秒、普通功能下1.6度/秒
2.5度/秒
2.5度/秒
最高5度/秒,平均3.3度/秒
铝质:升4度/秒,降3度/秒;银质:升6度/秒,降4.5度/秒
15度/秒
0.1-20度/秒
升4.8度/秒,降2.5度/秒
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