改良罗氏结核杆菌液体培养基使用说明书.docxVIP

改进罗氏结核杆菌液体培养基使用说明书 本产品在Middlebrook7H9液体培养基的基础上，增添了作为显色指示剂，开发用于结核杆菌检测的液体培养基。 结核杆菌将指示剂复原，在白色的固体上形成鲜红色的菌落，所以，能够目测很清楚地判断菌体有无繁殖。因此，关于判断，不需要特殊的仪器设施。 [组成]4ml×20支 [用途]在咳痰、支气管洗净液、骨髓液、淋巴结、脓液、胸水的结核杆菌分 离培养检查中、检测菌体的繁殖。 [测定方法（测定原理）] 在培养基中接种菌体，在菌增殖的同时指示剂被吸收到菌体内，指示剂因菌体内的复原酶被复原，变成难溶性的红色色素。由此，增殖的菌落染成红色，所以以目测就能够很容易确认菌体的增殖。 [操作方法] 1、检体的调制（前办理法） 将供试于结核杆菌检测的检体以适合的方法进行前办理，将目标菌体以 外的菌（杂菌）进行杀菌和除菌办理，同时使检体均等化。 ●咳痰、支气管洗净液、骨髓液、淋巴结、脓液、尿液 对认为有杂菌混在的检体，往常进行以下的前办理。 I）检体中加入等量的2%NaOH溶液，以此为基础，加入前办理剂，搅 拌15-20分钟后静置。难以混淆平均的时候，加入少量NALC粉末或许 NALC溶液即可。 ）磷酸缓冲液离心分别，弃去上清液，在积淀中加入磷酸缓冲液悬浊作为检体。 ●骨髓液、胸水 以无菌性的采集、认为不混淆菌的检体就没有必要进行前办理，可是有可能混淆有杂菌的时候，与上述I）、II）同样进行前办理。 2、检体的接种 将办理过的检体0.1-0.5ml接种到本产品中，接种检体附着在管壁上，不能全部进入培养基时，这部分检出率会下降，所以使培养基不沾到盖子的程度轻轻地搅搅拌。 3、培养 旋紧栓塞，往常放在36-37℃的孵化器或孵化室培养。 4、察看、判断 察看最好是每日进行，可是在检查室，以最适时间间隔进行观察，以目测进行。在培养基的底部有白色指示剂，其上有红色菌落产生时作为菌阳性。 ●至阳性产生的培养时间因检体中的菌的种类和菌量不同而有差别。第 3-5日左右能够察看到杂菌的生长可迅速的菌的繁殖。第7日左右进行第2次察看，尽量在这之后每隔2-3日察看一次。一直察看到第8周，在白色指示剂上还没有变化，作为最终的判断，判断为菌阴性。 5、确认 混入的杂菌也有可能形成红色菌落，所以检测为阳性的菌体必须用涂抹检查等方法进一步确认是否为结核杆菌。 ●在后边的检查中需要大量的分别培养菌时，即便是微量生长，在菌落确认后，搅拌培养基持续培养的话，能够培养达到必要量。 [使用上或或许办理上的注意点] 1）目的菌为结核杆菌，办理上要充分留神。 2）指示剂反响显示菌阳性时，必须用涂抹染色等方法进行确认是否为 结核杆菌。 3）本产品遇强光，有时会变成红色，所以要保留在灰暗处。 [贮存及有效期限] 1）贮存：2-10℃灰暗处保留； 2）有效期限：4个月。