B族链球菌操作注意事项.docVIP

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2023-07-29 发布于湖北
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B族链球菌操作注意事项.doc

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B族链球菌DNA提取操作注意事项一、样本前期准备: 1. 样本存放:待测样本在2-8℃保存不应超过24小时,-18℃一下保存不超过4天。 2. 溶血样本、保妇康栓、皮炎平对检测结果有显著影响,应尽量避免这些样本的检测。二、DNA提取: 1.空白对照品、阳性对照品应与样本同时提取DNA。 2.空白对照品、阳性对照品在使用前需充分混匀。 3.往样品管中加入DNA提取液时,DNA提取液应是充分混匀的,如若有沉淀,应混匀后再用三、PCR反应液配置: 1.PCR反应液在使用前应充分震荡混匀。 2.PCR反应液应尽量避免反复冻融。 3.配置好的体系在上机前应短暂离心。 4.配置好的体系应立即上机进行检测。四、PCR扩增程序设置: 1.选择通道应为FAM、VIC(ABI7500),参比荧光为none。 2.设置60℃时采集荧光信号。五、结果分析: 1.阴、阳性对照扩增结果应在同一实验中满足说明书要求。 2.灰区样本应重新进行检测,重新检测结果FAM通道无CT值且VIC通道CT值≤35 时结果为阴性,否则为阳性结果。六实验结束后处理: 1 扩增结束后不要打开管子,应密封丢弃于指定容器中。 2 实验室必须严格遵循PCR基因扩增实验室的管理规范。