【DNA重组】分子生物学-10-1-G库.pptxVIP

5.2.6 基因组文库的构建;1.起因：绝大多数基因难以直接分离得到;未知基因更难克隆;2. 克隆未知基因常用建库的方法;3.基因文库概念;基因文库包括基因组DNA文库和cDNA文库;5. 构建基因组文库常用人工染色体载体;6.基因组DNA文库的质量标准;7.计算文库规模的公式;8.基因组DNA文库构建的程序 ;4.DNA文库构建的程序;;?1、利用质粒载体 构建小文库;;利用YAC载体构建基因组文库;6.基因组DNA文库的保存;2 文库在液体培养基中扩增保存;3 保存单个克隆子于含有甘油的培养基中;表型筛选法：表达性状易于鉴别，如互补筛选 抗性筛选法：如二氢叶酸还原酶可以使三甲苄 二氨嘧啶降解，而该化学物可抑制大肠杆菌生长 分子杂交法：利用分子探针对文库进行筛选 免疫筛选法：利用多肽等作为抗原进行原位杂交筛选 PCR筛选法：根据保守序列合成引物，扩增特异性片段;