黄芪总黄酮对高糖培养下牛视网膜血管周细胞凋亡的影响的开题报告.docxVIP

黄芪总黄酮对高糖培养下牛视网膜血管周细胞凋亡的影响的开题报告 【开题报告】 一、选题背景及意义 糖尿病视网膜病变是导致失明的主要原因之一，其中视网膜血管周细胞（retinal pericytes，RPs）的凋亡是病变的主要特征之一。黄芪（Astragalus membranaceus）为常用的中药，其主要化学成分为黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。文献报道，黄芪总黄酮（Astragaloside IV）可通过抑制细胞凋亡保护视网膜的功能。本文旨在探究黄芪总黄酮对高糖培养下牛视网膜血管周细胞凋亡的影响，以期为糖尿病视网膜病变的防治提供新的方向和参考。 二、研究内容和方法 1. 研究内容 本研究将探究黄芪总黄酮对高糖培养下牛RPs凋亡的影响。 2. 研究方法 （1）实验材料与试剂 牛视网膜血管周细胞、高糖培养基、黄芪总黄酮、MTT试剂、Annexin V-FITC/PI试剂盒、向日葵油、苏木精-伊红染色液等。 （2）培养条件 将牛RPs培养于DMEM/F12培养基中，添加10%胎牛血清，37℃下5%CO2培养。高糖组，在DMEM/F12中加入100mM葡萄糖，同时添加不同浓度的黄芪总黄酮，培养24h。对照组为正常对照组和空白对照组。MTT染色法检测黄芪总黄酮处理后细胞的生存率。 （3）Annexin V-FITC/PI双染标法检测RPs凋亡 采用Annexin V-FITC/PI双染标法检测RPs凋亡情况，用流式细胞术进行分析。 （4）组织学检测 用苏木精-伊红染色液染色并观察培养的牛RPs细胞状态，用倒置显微镜观察并拍摄照片。 三、预期结果及意义 预计黄芪总黄酮可降低高糖培养下牛RPs凋亡率，增强细胞存活率，保护视网膜的功能。由于黄芪为常用的中药，其总黄酮类化合物具有广泛的药理作用，因此本研究结果对于糖尿病视网膜病变的防治具有现实意义和应用价值，也为黄芪总黄酮的开发利用提供实验依据。