DB37_T 3610-2019恩诺沙星注射液中乙酰甲喹、水杨酸的测定－高效液相色谱法.pdf

ICS11.220B 41DB37山長东省地電方标准DB 37/T 3610—2019恩诺沙星注射液中乙酰甲喹、水杨酸的测定一高效液相色谱法Determination maquindox and salicylic acid in enrofloxacin injection by highperformance liquid chromatography2019-07-23发布2019-08-23实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T次前言1I1范围.2规范性引用文件3原理4试剂或材料，5仪器设备6测定步骤，6.1供试品溶液的制备6.2对照品溶液的制备6.3仪器参考条件.6.4测定7试验数据处理8检测方法的灵敏度、准确度和精密度9图谱. DB37/T 言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由山东省市场监督管理局提出并监督实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省善药质量检验所。本标准主要起草人：季有志、薄永恒、冯涛、陈玲、徐红玮、张琦、刘宵飞、刘道中。II DB37/T诺沙星注射液中乙酰甲喹、水杨酸的测定一高效液相色谱法1范围本标准规定了恩诺沙星注射液中乙酰甲喹、水杨酸的高效液相色谱测定方法，本标准适用于恩诺沙星注射液中乙酰甲喹、水杨酸的测定。本方法乙酰甲唑检出限为0.25mg/ml、水杨酸检出限为0.5mg/mL。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理思诺沙星注射液中乙酰甲唑、水杨酸经稀释后用高效液相色谱分离，二极管阵列检测器检测，保留时间和紫外光谱对照定性，外标法定量试剂或材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯：水符合GB/T6682一级水的规定。4. 1乙睛（CHN）：色谱纯4. 2三乙胺（C,HsN）：优级纯。4.3甲醇（CH,OH）：色谱纯。4.4磷酸（HPO.）：含量≥85%。4.5乙酰甲唑（CinHaN:0）、水杨酸（C.H0）对照品：纯度≥98%4. 60.025mo1/L磷酸落液：量取磷酸落液（4.4）1.70mL（准确至0.01ml），置1000ml容量瓶中，加水900ml，用三乙胺调节pH值至3.0，用水溶解并稀释至刻度，播匀。4. 7流动相（0.025mo1/L磷酸溶液+乙睛=85+15）：取0.025moL/L磷酸溶液850ml（4.6）加入乙睛（4.1)150 mL，#摇匀，过0.22μm有机微孔滤膜。现用现配。4.8有机微孔滤膜：0.22μm。5仪器设备5.1高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器。5.2分析天平：感量0.00001g。6测定步骤 DB37/T 3610—20196.1供试品溶液的制备量取恩诺沙星注射液1.0mL，置50ml容量瓶中，加甲醇（4.3）稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL置50叫容量瓶中，用流动相（4.7）稀释至刻度，摇匀，即得。6.2对照品溶液的制备称乙酰甲唑、水杨酸对照品（4.5）50mg（准确至0.01mg），置50mL容量瓶中，加甲醇（4.3）稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL置100ml容量瓶中，用流动相（4.7）稀释至刻度，摇匀，即得，4℃保存。6.3仪器参考条件6.3.1高效液相色谱参考条件色谱柱：C色谱柱，4.6mm×250mm，5μm，或性能相当者：流动相：0.025mo1/L磷酸溶液+乙腈=85+15（4.7）：流速：1.0 ml/min;进样量：10μL:柱温：25℃C。6.3.2二极管阵列检测器参考条件定性采集波长范围：200nm~400nm定量波长：232nm。6.4测定6. 4. 1定性测定通过样品溶液色谱图的保留时间与相应对照品溶液的保留时间以及色谱峰的紫外光谱相对照定性样品溶液与对照品落溶液保留时间的相对偏差不大于2.5%：样品落溶液色谱峰的紫外光谱与对照落溶液色谱峰的紫外光谱一致，则可判断样品中存在乙酰甲喹、水杨酸。6.4.2定量测定取供试品溶液和对照品溶液各10μL注入液相色谱仪，在上述色谱条件下进行测定，记录232nm波长处的色谱图，外标法定量。试验数据处理供试品落液中乙酰甲唑或水杨酸浓度接按（1）进行计算：C =_ Cs × AxAs(1)式中：Gr 一供试品溶液中乙酰甲喹或水杨酸浓度，单位为微克每毫升（μg/L）：Cs -一对照品溶液中乙酰甲喹或水杨酸浓度，单位为微克每毫升（μg/L）：Ar 一供试品溶液中乙酰甲喹或水杨酸峰面积：As对照品溶液中乙酰甲喹或水杨酸面积。2 DB37/T样中乙酷甲或水杨酸的含量按（2