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- 2023-07-31 发布于上海
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§5.3《血红蛋白的提取和分离》导学案
班级:高二( )班 姓名:
【学习目标】
概述凝胶色谱法、电泳法分离大分子的基本原理。
知道缓冲溶液的作用。
尝试对血液中血红蛋白进行提取和分离,体验从复杂体系中提取生物大分子的基础过程和方法。
掌握对样品的预处理、色谱柱制作及装填等操作,进行样品的加入和洗脱并最终分离出血红蛋白。
【自主学习】一、基础知识
蛋白质的分离依据:
蛋白质特性的差异,如分子的形状和 、所带 的性质和多少、溶解度、 和对其他分子的亲和力等。
凝胶色谱法:
(1)概念:也称做 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。(2)凝胶的特点形态:
微小的
组成:大多数由 构成结构:内部有许多
(3)常用凝胶: 和琼脂糖。(4)分离原理。
①相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道 ,路程 ,移动速度 ,通过凝胶的时间
。
②相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道 ,只能在凝胶 移动,路程 ,移动速度
,通过凝胶的时间 。
缓冲溶液:
作用:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制 对溶液 pH 的影响,维持 pH 基本不变。
配制: 通常由 1 ~ 2 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的 就可以制得
的缓冲液。
意义:为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程,保持 与体内环境中的 pH 基本一致。
电泳:
(1)概念:
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