DB37T 608-2006猪肉中磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.120.10B40DB备案号山東东省地方标准DB37/T608—2006猪肉中磺胺类药物残留量的测定高效液相色谱法Determination of sulfonamides residue in porkhigh performance liquid chromatography200×-××-××发布2006-07-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 608—2006前言本标准由山东省备牧办公室、山东省畜牧业标准化技术委员会提出，本标准起草单位：山东省畜产品质量检测中心。本标准主要起草人：高迎春、陈玲、冯修光、魏秀丽 DB37/T 608—2006猪肉中磺胺类药物残留量的测定一高效液相色谱法1范围本标准规定了猪肉中磺胺嘧啶(SD)、磺胺间甲氧嘧啶(SMMI)、磺胺地索辛(SDM)、磺胺二甲氧嘧啶(S)、硕胺甲氧嗪(SMP)、硕胺甲恶唑(SZ)、磺胺喹恶琳(SQ)单个或混合物残留量的高效液相色谱法测定法。本标准适用于猪肉中磺胺类药物残留量的测定，最低检出限为20ug/Kg。22规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理猪肉中的磺胺类药物经乙腈提取，正已烷分配，再经碱性氧化铝SPE柱净化后，用HPLC分离，紫外检测器在270nm处测定。试剂与材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水符合GB/T6682一级水的规定。4. 1磺胺类药物(SD、SM、SDN、SM、SMP、SMZ和SQ)对照品：含量均不得少于99.0%4.2乙睛（CHCN）：色谱纯。4.3甲醇（CH,OH）：色谱纯。4.4正已烷（CH）.4.5正丙醇（CH:0H）4.6磷酸(H,PO,)。4. 7无水硫酸钠(Na:S0)。4.8乙睛水：量取乙睛（4.2）95mL，加水5mL，混勾4.9HPLC流动相4.9.1磷酸溶液c【（HP0）】=0.02moL/L：量取磷酸（4.6）1.4mL，用超纯水稀释至1000nL，过0.45期水系微孔滤膜备用，4.9.2流动相：磷酸溶液（4.9.1）+乙睛（4.2）=80+20，混匀，脱气后备用。量瓶中，加甲醇（4.3）落解并稀释至刻度，播匀，其浓度为100g/mL。4.11磺胺类药物标准中间液：精密量取磺胺类药物标准储备液（4.10）10.00mL，置100mL量瓶中，用流动相（4.9.2）稀释至刻度，摇匀。其浓度为10Hg/mlL。4.12磺胺类药物标准工作液：精密量取磺胺类药物标准中间液（4.11）1.00mL、2.00mL、3.00mL分别于100ml量瓶中；另精密吸取2.00mL、3.00ml分别于50ml量瓶中：另精密吸取2.00mL于25ml量期1 DB37/T 608—2006中，用流动相（4.9.2）稀释成浓度分别为0.10μg/mL、0.20Hg/mL、0.30Hg/mL、0.40Hg/mlL、0.60Hg/mL和0.80Hg/mL的系列标准工作液。现用现配，5仪器5. 1高效液相色谱仪：具紫外检测器。5. 2天平：量0.01g。5. 3分析天平：感量0.0001。5. 4 旋转蒸发仪。5. 5固相萃取装置（配考克阀）：5. 6振荡器。5. 7匀浆机（10000r/min）5. 8离心机（5000r/min），5. 9真空泵。5. 10碱性氧化铝SPE柱：每根柱填料量约为2g。5. 11针头过滤器：孔径为0.45Hm有机系滤膜5.12离心管：50ml.5. 13茄形瓶：100ml。6分析步骤6.1碱性氧化铝(SPE)柱前处理取碱性氧化铝(SPE)小柱，乙情-水（4.8）10mL淋洗后备用。6.2提取称取5g土0.05g供试试样，置50mL离心管（5.12）中，加入无水硫酸钠（4.7）4g和乙睛（4.2）10mL，玻璃棒充分揽拌，勾浆30S，中速振摇5min，离心5min，上清液转移至分液漏斗中，加入正已烷（4.4）10mL充分振播，静置分层后取下层液。另取乙晴（4.2）10mL将沉淀物重复提取一次，离心，上清液转移至原分液漏斗经同一份正已烧（4.4）分配，合并两次下层液于100mL形瓶（5.13）中加入正内醇（4.5）5mL，40C减压浓缩至近干。残余物用乙-水（4.8）3mL落解，过碱性氧化铝(SPE柱（6.1）。用乙睛-水（4.8）5mL洗涤茄形瓶一次，洗涤液过同一柱，真空抽干。精密加入流动相（4.9.2）1.0mL洗脱，真空抽干，洗脱液用0.45μm有机系滤膜（5.11）过滤，滤液待测。同时做试剂空白。6