DB37_T 3762-2019鸡蛋中金刚烷胺残留量的测定　液相色谱－串联质谱法.pdf

ICS11.220B 41DB37山 東东省地方标准DB37/T3762—2019鸡蛋中金刚烷胺残留量的测定液相色谱一串联质谱法Determination of amantadine residue in eggs by high performance liquidchromatography-tandem mass spectrometry2019-12-05发布2020-01-05实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 3762—2019目次前言111范围，2规范性引用文件3原理4试剂或材料5仪器设备6试验步骤，6.1试样的制备6.2提取6.3净化..6.4标准曲线的制备6.5测定6.6空白试验7试验数据处理8检测方法的灵敏度、准确度和精密度8.1灵敏度..8.2准确度.8.3精密度附录A（资料性附录）标准物质多反应监测色谱图 DB37/T 3762—2019前 言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由山东省市场监督管理局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所。本标准主要起草人：杨修镇、陈玲、李有志、尹伶灵、张呈军、牛华星、刘少宁、关晓敏。II DB37/T 3762—2019鸡蛋中金刚烷胺残留量的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了鸡蛋中金刚烷胺残留量检测的液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于鸡蛋中金刚烷胺残留量的检测，本方法检出限为1μg/Kg，定量限为3g/Kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理鸡蛋中残留的金刚烧胺用1%乙酸乙睛落液提取，正已烷液液分配去脂，液相色谱分离，串联质谱正离子模式测定，内标法定量，试剂或材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯：水符合GB/T6682一级水的规定。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙睛：色谱纯。4.3正已烷：色谱纯。4. 4冰乙酸：优级纯。4.5甲酸：色谱纯。4.6无水硫酸钠。4. 71%乙酸乙腈溶液：量取冰乙酸10ml（4.4），置1000mL容量瓶中，用乙睛（4.2）溶解并稀释至刻度，摇匀。4.820%乙睛水溶液：量取乙睛（4.2）20mL，置100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇勾。4.90.1%甲酸水溶液：吸取甲酸（4.5）1.0mL，置1000mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，据匀。4.100.1%甲酸甲醇落液：吸取甲酸（4.5）1.0mL，置1000mL容量瓶中，用甲醇（4.1）落解并稀释至刻度，摇勾。4.11金刚烷胺对照品（分子式CHsN）：纯度≥98%。4. 12Ds-金刚烷胺标准品（分子式CioHND）：纯度≥99%I DB37/T 3762——20194.13金刚烷胺、D-金刚烧胺标准贮备液：精密称取金刚烧胺标准品（4.11）和D-金刚烧胺标准品（4.12）各10mg，分置10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，配制成浓度各为1mg/nl的标准贮备液，-20℃以下保存，有效期3个月，4.14金刚烷胺、D-金刚烷胺标准工作液：分别精密量取金刚烷胺贮备液和D-金刚烷胺贮备液（4.13各100μL，分置100mL容量瓶中，用20%乙睛水溶液（4.8）移释至刻度，配制成浓度各为1μg/mL的标准工作液，2℃～8℃保存，有效期2周。4.15有机滤膜：0.22μm5仪器设备5.1液相色语-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。5.2分析天平：感量0.00001g、0.01g。5.3均质机。5.4涡旋混合器。5.5离心机：转速8 000 r/min.5.6氮吹仪。6试验步骤6.1试样的制备取5枚新鲜或冷藏的空白或供试鸡蛋，去壳后用均质机匀累，-20芒以下保存。6.2提取称取试料2.0±0.05g（精确至0.01g）置50mL离心管中，加入D-金刚烷胺标准工作液（4.14）20μL，再加入1%乙酸乙睛溶液（4.7）10mL，涡旋2min，8000r/min离心5min，上清液转入另50mL离心管中，重复提取一次，合并两次上清液，备用。6.3净化备用液中加入无水硫酸钠3g，乙睛饱和的正已烷10mL，涡旋1min，8000r/min离心5min，弃去正已烷层，剩余溶液转至另一50mL离心管中，40℃水浴氮吹至干，用1.0mL20%乙水溶液（4.8）溶解残渣，转移至10mL离心管中，加入20%乙睛水溶液饱和的正已烷2nL，涡旋1min，8000r/min离心5min，取下层落液，用有机滤膜过滤，供上机测定。6.4标准曲线的制备精密量取金刚烷胺和D-金刚烷胺标准工作液（4.14）适量，用2