DB37T 1246-2009化妆品中对羟基苯甲酸酯类的测定 高效液相色谱法.pdf

1CS 67.020X 04DB37山东省地方标准DB37/T妆品中对羟基苯甲酸酯类的测定高效液相色谱法Determination of p-hydroxybenzoic acid easters in cosmeticsHigh performance liquid chromatography2009-05-31发布2009-07-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T本标准附录A为资料性附录。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东省食品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量监督检验研究院。本标准主要起草人：霍艳敏、张娟、宿书芳、薛霞、周莉莉。 DB37/T1246—2009化妆品中对羟基苯甲酸酯类的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了高效液相色谱法测定化妆品中对羟基苯甲酸酯类的方法。本标准适用于化妆品中对羟基苯甲酸甲酯、对轻基苯甲酸乙酯、对羟基本甲酸内酯、对羟基本甲酸异丁酯和对羟基苯甲酸丁酯的测定。本标准检出限：各组分均为1.ong/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的弓用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是合可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的乃用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样用甲醇漩涡，超声波提取，离心过滤，以高效液相色谱分离，二极管阵列检测器或紫外检测器检测，以保留时间定性，二极管阵列检测器还可以光谱图定性，外标法定量。4试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1E甲醇（色谱纯）。4.2乙酸铵。4.320mmpl/L乙酸铵溶液：称取1.54g乙酸胺，一级水解，定容至1000mL容量瓶。4.4标准品：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯和对羟基苯甲酸丁酯（纯度990%)。4.5标准储备溶液：分别准确称取25mg对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、异丁酯和丁酯于25.00L容量瓶中，甲醇溶解，定容，作为标准储备溶液，浓度均为Img/。再配制成2000ug/血L的混合标准溶液，此溶液于4C冰箱中储存。4.6标准工作溶液：将混合标准落液用甲醇依次稀释成1.0ug/L、10.0ug/L、25.0ug/、50.0μg/L、100.0μg/L的系列标准游液。使用前配制。4.7微孔减膜：有机相，0.45μ。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：具二极管阵列检测器或紫外检测器。5.2天平（感量0.01g和0.1mg）5.3漩涡混合器。5.4超声波清洗器。5.5离心机（转速不低于10000转/分钟）。6分析步骤6.1试样的处理 DB37/T取2g（精确至0.01g）试样于50nL离心管中，加入2500nL甲醇，混匀，流涡混合2min，超声波提取15min10000转离心5min，取上清液经微孔滤膜（4.7）过滤后备用。6.2液相色谱操作条件a)色谱柱：C18柱，250x4.6m(i,d)，5μm，或性能相当者；b）流动相：甲醇+20mmp1/L乙酸铵溶液=60+40（体积比)；c)流速：1.0mL/min;d柱温：45℃；e）进样体积：5uL。f)检测波长256rm6.3测定步操将标准工作溶液（4.4）按照浓度由低到高的顺字进样测定，以各组分峰面积对其浓度绘制标准曲线。试样溶液进样后，以各组分在25n波长下色谱图中的保留时间和相应的光谱图定性，标准曲线定量。6.4计算按下式计算试样中各组分的含量：X =CxV1000×m式中：X试样中某组分的含量，单位为克每千克（g/kg)：C—由标准曲线得到的试样溶液中某组分的质量浓度，单位为微克每毫升（呕/nL)；试样游液的体积，单位为毫升(mL);要—试样质量，单位为克（g）计算结果保留三位有效数字。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。2 DB37/T1246—2009附录A（资料性附录）五种对羟基苯甲酸酯标样的色谱图0.080.06对羟苯甲酿乙酯对羟基苯甲酸甲酯甲酸丙酯对羟基苯甲酸异丁对羟基苯0.02酯甲酸丁酯0.002.00 4.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0Cmin图A.1五种对羟基苯甲酸酯标样的色谱图3 DB37/T XXX- 2009