SNT 1135.4-2006马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1135.4—2006马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法Identification of Thecaphora solani (Thirumalachar OBrien) Mordue2007-03-01实施2006-08-28发布中华人民共和国发布O国家质量监督检验检疫总局数码防 SN/T 1135. 4-2006前言SN/T1135共分为四个部分：马铃薯癌肿病检疫鉴定方法;马铃薯黄化矮缩病毒检疫鉴定方法；-马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法；马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法。本部分是SN/T1135的第4部分。本部分的附录A和附录B为资料性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院。本部分主要起草人：吴品珊、严进。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。- SN/T 1135. 4—2006马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法1范围SN/T1135的本部分规定了进境植物检疫中马铃薯黑粉病菌LThecaphora solani（ThirumulacharOBrien)Mordue]的检疫和鉴定方法。本部分适用于来自马铃薯黑粉病发生国家和地区(参见附录A)的种用、食用和加工用等用途的马铃薯(Solanum tuberosum L.)的马铃薯黑粉病菌的检疫和鉴定。2　定义和术语下列术语和定义适用于SN/T1135的本部分。2. 1孢子球spore ball许多孢子紧密地集结成一团。2.2孢子spore真菌的繁殖体，包括从营养体直接产生的无性孢子和经过性结合和核相变化后产生的有性孢子，单细胞至多细胞以及多种形态，是真菌分类的主要依据。本部分所涉及的孢子是指马铃薯黑粉病菌的次生菌丝间的细胞形成的黑粉孢子，也称冬孢子。2.3块茎 tuber地下茎末端肥大成块状,适应贮藏和越冬的变态茎。其表面有许多芽眼，一般作螺旋状排列，芽眼内有芽。3原理3.1分类地位马铃薯黑粉病菌[Thecaphora solani（Thirumulachar OBrien）Mordue Angiosorus solaniThirumulachar OBrien}属于真菌界(Fungi)，担子菌门(Basidiomycota)，黑粉菌纲(Ustilaginomyce-tes），黑粉菌目（Ustilaginales），球黑粉菌科（Glomosporiaceae），楔孢黑粉菌属（Thecaphora Finger-huth)。3.2寄主马铃薯黑粉病菌主要侵染马铃薯（Solanum tuberosum L.），也侵染茄属（Solanum L.）中的其他一些种, 包 括 Solanum andigenum, S. stoloniferum, S. ajanhuiri, S. stenotomun, S. curtilobum,S. chaucha,S. goniocalyx。 此病菌还能侵染番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)。3.3鉴定原理马铃薯黑粉病菌侵染马铃薯块茎，块茎可以部分或全部受害，病组织呈现浅褐色至黑褐色斑点，即为病菌孢子堆，孢子堆里充满锈褐色至黑褐色孢子球。马铃薯黑粉病的这一症状特点和病原菌形态是鉴定马铃薯黑粉病菌的依据。1 SN/T 1135. 4—20064仪器设备和实验用具4.1仪器设备体视显微镜、显微镜（具油镜和测微尺）、超净工作台。4.2实验用具刀、剪、镊子、挑针、滴管、载玻片、盖玻片。5实验室检验5. 1 症状观察马铃薯块茎可以部分或全部受害，外观畸形，具瘤状突起和肿块，质地坚硬。对抽取的样品逐块仔细检查块茎表面是否有上述症状。切开块茎病组织，可见浅褐色至黑褐色斑点，即为病菌孢子堆，孢子堆里充满锈褐色至黑褐色孢子球，参见附录B。5.2显微镜检验从黑褐色病斑部位挑取少量病组织，以水作浮载剂，制成玻片，在显微镜下观察是否有马铃薯黑粉菌冬孢子。详细记录并测量孢子球和冬孢子大小。5.3鉴定特征T.solani孢子球近圆形至不规则形，呈肉桂色至锈褐色或黑色。未成熟的孢子球颜色较淡，呈浅褐色，孢子球成熟后颜色变暗，一般由2个～8个冬孢子组成，通常 3个～6个。冬孢子间的结合呈中等硬度,孢子球表面有一层薄壁，冬孢子可以分离开。孢子球大小(15 μm～50 μm）×（12μm～40 μm)，平均30.8 μm×24.5 μm。冬孢子呈淡黄色至亮红赫褐色，冬孢子近圆形至有棱角或不规则的圆锥形，直径8μm～22μm，平均16.7μm。几个冬孢子结合组成孢子球，冬孢子间接触面平而光滑，壁厚0.5um～1um，外围孢子的外侧壁粗糙,有瘤状物，壁厚2 μm～2.5 μm，少数可到 4 μm（包括疣突），疣状突起分界面光滑，疣突尖锐。病原菌形态特征参见附录B。6结果判定