SN 1628-2005进出口肉及肉制品中氯氰典柳胺残留量测定方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1628—2005进出口肉及肉制品中氯氰碘柳胺残留量测定方法高效液相色谱法Determination of closantel residues in meat and meat productsfor import and export--HPLC2005-08-18 发布2006-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1628--2005前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：王凤池、马振栋、艾连峰、窦彩云。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1628-—2005进出口肉及肉制品中氯氰碘柳胺残留量测定方法‧高效液相色谱法1 范围本标准规定了肉及肉制品中氯氰碘柳胺残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于牛肉、羊肉中氯氰碘柳胺残留量的测定。2测定方法2.1方法提要试样中的氯氰碘柳胺残留用乙腈提取，经正已烷-乙腈液液分配净化，蒸干后用乙腈定容，用配有荧光检测器的高效液相色谱仪测定,外标法定量。2.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。2.2.1 乙腈：HPLC级，用正已烷饱和。2.2. 2甲醇。2.2.3三乙胺。2.2.4磷酸：优级纯。2.2.5无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密闭容器中备用。2.2.6正己烷：用乙腈饱和。5 μm滤膜。2.2.8氯氰碘柳胺标准品：纯度≥98.0%。2.2.9标准储备液:准确称取 10 mg(精确至 0. 1 mg)氯氰碘柳胺标准品，用乙腈溶解,转移至 20 ml容量瓶中,用乙腈定容至刻度。此溶液浓度为0.500 mg/mL,1℃～4℃下保存，保存期为1年。2.2. 10标准中间液：吸取 1.00 mL标准储备液，用乙腈定容至 50 mL 容量瓶中。浓度为10.0μg/mL,1℃～4℃下保存,保存期为3个月。2. 2. 11标准工作液：根据需要，吸取一定量的标准中间液，用乙腈稀释成标准工作液，现用现配。2.3仪器和设备2. 3. 1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。2.3.2超声波清洗器。2.3.3旋转蒸发器。2.3.4氮吹仪。2.3.5酸度计。2. 4测定步骤2.4.1提取称取5g(精确至0.01g)绞碎、混匀后的实验室样品于100mL具塞磨口锥形瓶中，加人50.0mL饱和正已烷的乙腈和约10g无水硫酸钠。盖紧塞子后，用力振摇，使样品分散开，然后在超声波清洗器上超声提取10min。将提取液用滤纸过滤到150 mL分液漏斗中。2.4.2净化向盛有滤液的分液漏斗中加人40mL饱和乙腈的正已烷，盖紧塞子，轻轻摇动数下后放气，然后振1 SN/T 1628—2005摇约 2 min,然后打开塞子,静置约 10 min。将适量下层溶液放出到一个锥形瓶中,准确移取 10 mL,用旋转蒸发器或氮吹仪50℃下蒸干，用乙腈定容至1.0mL，混匀后超声约2min。溶液过0.45μm膜后供液相色谱测定。2.4.3测定液相色谱条件色谱柱:Cis柱或相当者,适用于 pH=2.5 的流动相，150 mm×4.6 mm(内径)填料颗粒直径a）5 μm.流动相：乙腈-水(75+25)+0.05%三乙胺,在酸度计测量下,用 H,PO.调至 pH一2.5。b)流动相流速：1.0 mL/min。c)）荧光检测器波长:EX:335 nm,EM:510 nm。d)e）进样量:20 μL。色谱测定根据试样中被测物的含量情况，选取响应值相近的标准工作液一起进行色谱分析。标准工作液和待测样液中氯氰碘柳胺的响应值均应在仪器线性响应范围内。对标准工作液和样液等体积参插进样测定。上述色谱条件下，氯氰碘柳胺的保留时间为17.6 min,标准品色谱图参见附录 A。2.4.4空白实验除不称取试样外,均按上述测定步骤进行。2. 4. 5结果计算和表述用色谱数据处理软件中的外标法，或按式(1)计算试样中氯氰碘柳胺的残留量：X= (A-Ao).c.V(1)A.:m式中:试样中氯氰碘柳胺的残留量，单位为毫克每千克(mg/kg);X--样液氯氰碘柳胺的色谱峰面积,单位为平方毫米（mm²）;A-1-空白实验氯氰碘柳胺的色谱峰面积,单位为平方毫米(mm²）;Ao-标准工作液中氯氰碘柳胺的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);样液最终定容体积，单位为毫升（mL)；V-标准工作液氯氰碘柳胺的色谱峰面积，单位为平方毫米（mm²）A,*最终样液代表的试样量，单位为克（g）。r3测定低限、回收率3.1测定低限本方法的测定低限为:0.1 mg/kg。3.2回收率3. 2. 1牛肉试样中回收率的实验数据添加水平为 0. 1 mg/kg、0.5 mg/kg、1