SN_T 0168-2015进出口食品中菌落总数计数方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0168—2015代替SN0168-1992进出口食品中菌落总数计数方法The aerobic plate counts in foods for import and export2015-02-09发布2015-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局1刮涂层查真伪 SN/T 0168—2015前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准主要参考美国食品和药物管理局（FDA）《细菌学分析手册》第八版第三章（2001年）。本标准代替SN0168一1992《出口食品平板菌落计数》。本标准与SN0168-1992相比，主要变化如下：将原标准名称《出口食品平板菌落计数》修订为《进出口食品菌落总数计数方法》，英文名称也做了相应的修改；-按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》规则增加了“术语和定义”“数字修约和计算”等标准编写要素及相关内容；-5.1中的样品制备程序对原标准有所改动；-APC的计算方法和计算公式做了修改-本标准由国家认证认可监督委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：苗丽、马艳艳、张子宏、李辑、杨娜、卢兴安、雷质文、李志培本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN 0168--1992。I SN/T0168—2015进出口食品中菌落总数计数方法1范围本标准规定了进出口食品中需氧菌及兼性厌氧菌的菌落总数计数方法。本标准适用于各种进出口食品及其原料，有专门规定检验方法的除外。其他产品可参考使用本标准。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1菌落总数aerobicplatecounts；APC食品检样经过处理，在一定条件（如合适的培养基、温度、时间等）下培养后，所得1mL（或1g）检样形成菌落的总数。本标准规定的培养条件下所得的结果，只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌的菌落总数。注：菌落总数是指产品中所有需氧微生物含量的高低，是衡量产品受污染程度的一项重要指标。2.2估计值 estimation of aerobic platercounts; EAPC平板菌落计数的估计值。2.3 colony-forming units;CFU菌落形成单位一个细菌在平板计数琼脂培养基上生长形成肉眼可见的菌落2.4多不可计toonumeroustocount，TNT平板上的菌落数太多而无法讨数2.5实验室事故laboratoryaccident;LA实验过程污染等导致结果无效的情况。3环境、设备和材料3.1环境要求：实验室环境要求干净、光照充足、通风良好，工作台要平稳且台面面积足够大。需定期对工作区域内空气中的微生物密度进行监测，可将倾注有琼脂的平血在空气中暴露15min后放培养箱（36℃土1℃）中进行培养，48h后每个平Ⅲ上的菌落不能超过15个。3.2均质器和均质袋或均质杯。3.3天平：感量0.1g。3.4剪刀、镊子、刀子、叉子或大汤勺：各实验室可根据自已的爱好选择，方便取样即可。3.5玻璃平皿或塑料平皿：建议使用15mm×90mm的平皿。3.6灭菌吸管或移液器：量程分别为1mL、5mL和10mL，刻度为0.1mL。1 SN/T 0168—20153.7带橡胶塞或塑料螺旋帽的玻璃稀释瓶：容量200mL。3.8恒温水浴箱：45℃土1℃，用来融化凝固的琼脂用。3.9恒温培养箱：36℃±1℃。3.10冰箱:0℃～~5℃。3.11冰柜:-20℃～-15℃。3.12合适温度范围的温度计（已计量）。4培养基、试剂4.1平板计数琼脂（参见附录A.1）。4.2磷酸盐缓冲稀释液（参见附录A.2）。4.3无菌生理盐水（参见附录A.3）。4.41mo1/L氢氧化钠（NaH）：称取40g氢氧化钠溶于1000ml.蒸馏水中。5程序5.1样品制备以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内。如有包装，则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。5.2制备样品匀液5.2.1固体或半固体样品：以无菌操作，取25g或25ml样品（根据样品分布的均匀性程度，也可酌情增减样品量，如50g或50ml等），放人装有225mL稀释剂（磷酸盐缓冲稀释液或无菌生理盐水，以下同）的灭菌均质杯内，于8000r/min均质1min～2min，或放人盛有225mL稀释剂的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。如样品均质时间超过2min，应在均质杯外加冰水冷却。5.2.2干燥或干粉食品：以无菌操作取25g样品，放人装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500ml稀释瓶中。迅速振摇，将样品混匀，制成1：10的样品匀液。振