NY_T 3200-2018香蕉种苗繁育技术规程.pdf

ICS 65.020.20B 66NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3200—2018香蕉种苗繁育技术规程Technical code of practice for Cavendish banana seedling propagation2018-03-15 发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部-发布 NY/T 3200—2018前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、热作两院种苗组培中心。本标准主要起草人：魏守兴、谢子四、魏军亚、黄丽娜、符运柳、韩丽娜、刘以道、覃和业。I NY/T3200—2018香蕉种苗繁育技术规程1范围本标准规定了香芽蕉（MusaAAACavendish sub-group）种苗繁育技术规程的术语和定义、种苗组培技术和种苗假植技术。本标准适用于香芽蕉种苗的组培繁育。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件，NY/T357香蕉组培苗NY/T2120香蕉无病毒种苗生产技术规范3术语和定义NY/T357界定的术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下重复列出了NY/T357中的某些术语和定义。3. 1香蕉组培苗bananatissuecultureplantlet利用优良香蕉品种的吸芽、茎尖等作为外植体，采用植物组织培养技术在培养容器中生长且已达到假植标准的完整无菌香蕉小植株。3. 2香蕉假植苗banana plantletplanted inculturebag香蕉组培苗分级假植于装有营养基质的特定规格容器中，经培育、可出圃供大田定植的香蕉小植株。3. 3假植temporaryplant从香蕉组培苗移于荫棚(苗圃)至假植苗出圃之前的整个育苗过程。3. 4诱导培养induction culture外植体经过消毒后，接种至分化芽诱导培养基中，于适宜温度和环境中进行茎尖分生组织培养。3. 5继代培养subculture在外植体初次培养基础上，把所获得不定芽转移到新鲜培养基中进行再培养，从而使培养物得以成倍增殖的过程，又称增殖培养。3. 6培养代数culture times同一外植体，经历继代培养的次数。3. 7生根培养rootingculture NY/T 3200—2018把增殖芽转移到生根培养基中诱导生根，培养成组培苗的过程。3. 8变异variation在组织培养过程中受培养基和培养条件等影响，培养出的香蕉植株遗传特性发生了明显变化，其形态上也显著表现出有别于原品种植株的特征，注：香蕉组培苗变异的主要特征表现为叶变细长，叶面不规则凹凸，叶片扭曲、失绿；叶柄变长；叶鞘散生呈散把；植株变矮等。4种苗组培技术4.1组培苗接种前的准备4.1.1培养基配制基本培养基母液配制香蕉组织培养所用MS培养基母液配制参见附录A植物生长调节剂配制将香蕉培养所用植物激素6-BA用1mol/LHCl溶解，NAA用95%酒精溶解，根据需要配制成一定浓度的母液，装人容器，贴上标签后置于4℃冰箱中保存。4.1.2培养基配置根据不同培养阶段所需要的培养基类型，取出所需量母液等放入容器中，然后加入7g卡拉胶（或琼脂）和3%蔗糖，用蒸馏水定容，加入相应的激素，搅拌均匀，用0.1mol/LNaOH或HCl调节pH至5.8，然后分装到培养容器中，边搅拌边分装，每瓶或每袋分装量为25mL～30mL。4.1.3培养基和其他用品灭菌将分装好的培养基和接种用具等置于高压灭菌器内，采用高温高压蒸汽灭菌方法进行灭菌。4.2外植体采集4.2.1采芽母本园品种纯正、无病毒病株的香蕉园。4.2.2种芽采集从母本园中选择健壮植株作为采芽母株，并做好标记。于晴朗天气，挖取优良母株健壮吸芽作为生产香蕉组培苗的外植体。4.3外植体无菌处理将吸芽修成以生长点为中心、直径3cm4cm、高4cm～5cm的组织块，自来水冲洗干净，75%酒精浸泡1min，然后修成直径1cm～2cm、长1cm～3cm的组织块，再用3%～~5%次氯酸钠消毒20min～30min，无菌水清洗3次以上。4.4外植体切割与接种将消毒好的组织块纵切为2块～4块，接种到诱导培养基上，并编好序号。4.5外植体诱导及病毒检测诱导外植体于适宜的温度和环境中进行茎尖分生组织培养，将初次培养的分化芽用聚合酶链式反应技术(PCR)或酶联免疫吸附法（ELISA)进行病毒检测。病毒检测方法按照NY/T2120的规定执行，经检测无病毒分化芽继续增殖培养。4.6外植体继代培养经检测无病毒分化芽接种至继代培养基中，于适宜温度和环境中