SNT 2127-2008进出口动物源性食品中β-内酰胺类药物残留检测方法 微生物抑制法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2127—2008进出口动物源性食品中β-内酰胺类药物残留检测方法微生物抑制法一Determination of β-lactam residues in foodstuffs of animal origin forimport and exportMIA method2008-09-04发布2009-03-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 18套 试真信数码防伪 SN/T 2127--2008前言本标准的附录 A为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。本标准主要起草人：郑晶、黄晓蓉、吴谦、冯家望、翁国柱、张体银、郑麟毅、吴芸芸。本标准系首次发布的出人境检验检疫标准。 SN/T 2127-2008进出口动物源性食品中β-内酰胺类药物微生物抑制法残留检测方法行1 范围本标准规定了动物源性食品中β-内酰胺类药物残留检测的试样制备、保存和微生物抑制检测方法。本标准适用于牛奶、肉类、鱼和虾中的苄青霉素、氨芒青霉素、羟氨青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、苯唑青霉素和头孢噻呋等药物残留筛选检测，阳性结果应用其他方法进行确证。 规范性引用文件2下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。巩是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—2008,ISO3696:1987,MOD)3试样制备和保存3.1试样制备3.1.1牛奶：取不少于500mL试样，装入清洁容器内，并标明标记3.1.2肉类、鱼和虾：从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放人高速捣碎机均质，充分混匀，用四分法缩分不少于500g试样-装人清洁容器内，并标明标记。3.1.3制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3.2试样保存3.2.1牛奶:0℃～4℃保存3.2.2肉类、鱼和虾：试样于一18℃以下保存，新鲜或冷冻组织样品可在2℃～6℃保存72 h。4测定方法4.1方法提要试样经缓冲液提取、温育和离心后，取上清液进行测定。利用抗生素对敏感菌的抑制作用来判别试样中是否含有抗生素。4.2设备和材料4.2. 1恒温箱:63℃±1℃。4.2.2离心机。4.2.3高速组织捣碎机。4.2.4恒温水浴锅：80℃。4.2.5涡旋振荡器。4.2.6显微镜:10×～100×。游标卡尺：测量范围0mm～200mm，精度0.02mm或抑制圈测量仪。.8灭菌平皿：直径 90 mm，底部平整的玻璃或一次性塑料灭菌平皿。4.2.9圆形滤纸片：直径10 mm,厚1.1mm。日本 Toyo Roshi Kaisha,Ltd.产品或同类产品。4. 2. 10克氏瓶。1 SN/T 2127—2008 4.2.11可调移液器:10 μL～100 μL,100 μL～1 000 μL。4.3菌种和培养基4.3.1菌种嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus ATCC10149。4.3.2培养基细菌保存培养基：见附录 A第 A.1章。 菌种芽孢培养基：见附录 A第 A.2 章。检定培养基：见附录 A第 A.3章。4.4试剂除非另有说明，本标准所用化学试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682的规定。 mol/L 盐酸溶液量取90mL浓盐酸用蒸馏水稀释至1000mL。 mol/L氢氧化钠准确称取4.0g氢氧化钠，溶解于100mL蒸馏水中。4.4.3缓冲液pH6.0磷酸盐缓冲液:称取 8.0g磷酸二氢钾（KH2PO）及2.0g磷酸氢二钾（K2HPO13H20），用蒸馏水溶解并定容至1000mL,121℃高压灭菌15min。磷酸盐缓冲液-丙酮磷酸盐缓冲液-丙酮：按体积比pH6.0磷酸盐缓冲液：丙酮一1：1比例制备。4.4.4抗生素标准液标准品：苄青霉素，纯度≥99%。苄青霉素标准储备液：准确称取适量的苄青霉素标准品，用灭菌pH6.0磷酸盐缓冲液（)溶解并定容至1000 μg/mL，置2℃～8℃冰箱保存,贮存期7d。苄青霉素标准工作液：吸取适量的青霉素标准储备液，用pH6.0磷酸盐缓冲液（）稀释成0.005μg/mL的标准工作液，应当日配制使用。4.5测定步骤4.5.1样液提取牛奶：取 20 mL 鲜奶于 50 mL离心管，3 000 r/min 离心5 min，除去上层脂肪层，以1.0 mol/L盐酸溶液或1.0 mol/L氢氧化钠调节 pH至6.5～7.0。脱脂奶可直接用于检测。肉