SN_T 4656.6-2017进出口纺织品生物安全检验方法 第6部分：沙门氏菌.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4656.6—2017进出口纺织品生物安全检验方法第6部分：沙门氏菌Biosafety testing methods of the textiles for import and export-Part 6 : Salmonella2017-11-07 发布2018-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局、刮涂层查真伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口纺织品生物安全检验方法第6部分：沙门氏菌SN/T 4656.6--2017*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045)总编室：（010址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*印张 1.25 字数 34 千字开本 880×12301/162018年7月第一版2018年7月第一次印刷印数 1-500*书号：155066·2-44561 SN/T 4656.6-2017前創言SN/T4.656《进出口纺织品生物安全检验方法》共分为6个部分：-第1部分：白假丝酵母菌；第2部分：大肠埃希氏菌；第3部分：大肠菌群；-第4部分：金黄色葡萄球菌；第5部分：菌落总数；一一第6部分：沙门氏菌。本部分为SN/T4656的第6部分。本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国河南出入境检验检疫局、中华人民共和国河北出人境检验检疫局。本部分主要起草人：李辑、郭会清、禹建鹰、徐超、王蕾、张勤、苗丽、乔晴、孙晓霞。 SN/T 4656.6—2017进出口纺织品生物安全检验方法第6部分：沙门氏菌1范围SN/T4.656的本部分规定了进出口纺织品中沙门氏菌的检验方法。本部分适用于进出口纺织品沙门氏菌的检验。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求GB/T 27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T 1538.2 培养基制备指南第 2部分：培养基性能测试实用指南3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1纺织品生物安全biosafety of textiles纺织品中携带的有害生物本身或其代谢产物对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施。3.2沙门氏菌Salmonella一种人共患病的病原菌，是一种革兰氏阴性肠杆菌。此菌营养要求不高，自然界分布极为广泛，可在食品、水、土壤、动物毛发、纤维中检出，可感染人和多种动物，大部分具有很强的致病性。目前所发现的沙门氏菌血清型有近3000个，其中许多血清型菌能在人和动物之间交叉感染，能引起人和动物的多种不同临床表现，主要引起发热、胃肠炎、腹泻和败血症等，给人类的健康造成了严重的危害。3.3环介导恒温扩增loop-mediated isothermal amplification;LAMP根据目标菌特有的靶序列保守基因设计的两对特殊的内、外引物，特异性识别靶序列上的六个独立区域，利用 EstDNA 聚合酶启动循环链置换反应，在等温条件（63℃左右）下保温 30 min～60 min 特异、高效、快速的完成核酸扩增。从 dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的 Mg?+结合，产生副产物（焦磷酸镁)形成乳白色沉淀，加人显色液，即可通过颜色变化观察判定结果。4设备、材料4.1常规微生物检测用的基本设备与材料。1 SN/T 4656.6--20174.2无菌剪刀、镊子。4.3电子天平：感量为0.01g。4.4无菌均质袋。4.5拍击式均质器：400mL。4.6无菌规格板：20cm²4.7无菌干燥棉拭子。4.8恒温培养箱：36℃±1℃、42℃士1℃。4.9全自动微生物生化鉴定系统。4.10接种环。4.11载玻片。4.12微量移液器:量程 1 μL～20 μL;量程 200 μL～1 000 μL。4.13灭菌离心管：1.5mL。4.14LAMP反应管。4.15高速离心机:2 000 r/min～13 000 r/min。4.16水浴锅:63℃±1℃。4.17LAMP实时浊度仪。5 5培养基、试剂5.1SCDLP液体培养基:见附录 A 中 A.2。5.2氯化镁孔雀绿肉汤：见A.3。5.3亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)：见 A.4。5.4亚硫酸铋琼脂(BS)：见 A.5。5.5沙门氏菌显色培养基。5.6营养琼脂：见A.6。5.7三糖铁(TSI)琼脂：见 A.7。5.8赖氨酸脱羧