NYT 1154.2-2006农药室内生物测定试验准则 杀虫剂 第2部分：胃毒活性试验 夹毒叶片法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1154.2—2006杀虫剂农药室内生物测定试验准则夹毒叶片法第2部分：胃毒活性试验Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart 2: The leaf sandwich test for insecticide stomach poisoning activity2006-07-10 发布2006-10-01实施3中华人民共和国农业部发布 NY/T 1154.2—2006前言《农药室内生物测定试验准则」杀虫剂》为系列标准本部分是《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》的第2部分。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部农药检定所。本标准主要起草人：姜辉、欧晓明、倪珏萍、陶岭梅、王晓军、曹兵伟。本标准由农业部农药检定所负责解释。1 NY/T 1154.2—2006农药室内生物测定试验准则杀虫剂第2部分：胃毒活性试验　夹毒叶片法1范围本部分规定了夹毒叶片法测定杀虫剂胃毒活性试验的基本要求和方法。本部分适用于杀虫剂胃毒活性测定的农药登记室内试验，其他试验参照本部分执行。2 试验条件2.1试验靶标试验靶标应选择龄期一致、敏感的鳞翅目幼虫，包括黏虫（Mythimna separata）、小菜蛾（Plutellarylostella）菜青虫（Pieris rapae）、茶尺（Ectropis obliiqu）、棉铃虫（Heliothis armigera）、斜纹夜蛾(Prodenia litura )、甘蓝夜蛾( Mamestra brasicae)、甜菜夜蛾(Spodoptera erigua)等。2.2仪器设备2.2.1电子天平(感量0.1mg);2.2.2打孔器,毛细管点滴器；2.2.312孔组织培养板；2.2.4直径为9cm培养皿;2.2.5烧杯；2.2.6移液管或移液器；2.2.7毛笔；2.2.8镊子等。3试验设计3.1试材准备选择室内饲养、3龄以上、龄期一致的敏感试虫。3.2药剂3.2.1试验药剂试验药剂采用原药（母药）,并注明通用名、商品名或代号、含量、生产厂家。3.2.2 对照药剂对照药剂采用已登记注册且生产上常用药剂的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。3.3试验步骤3.3.1药剂配制水溶性药剂用蒸馏水溶解后用有机溶剂(丙酮)稀释,其他药剂选用合适的有机溶剂(如丙酮、二甲基亚砜、乙醇等)溶解并稀释。根据预备试验,按照等比或等差的方法设置 5个～7个系列质量浓度。3.3.2试虫准备1 NY/T 1154.2—2006挑选龄期一致的试虫，饥饿4h～8h，选取50头幼虫，用电子天平称量，计算每头乎均质量。3.3.3夹毒叶片制作用直径1cm的打孔器打取叶碟,放人培养皿,并注意保湿。用毛细管点滴器从低浓度开始,每叶碟点滴1uL～2uL药液,待溶剂挥发后和另一片涂有淀粉糊（或面粉糊)的叶碟对合制成夹毒叶碟，制作完毕放于12孔组织培养板的孔内。每处理4次重复,每重复不少于 12个夹毒叶碟,并设不含药剂的相应的有机溶剂的处理作为对照。3.3.4药剂处理组织培养板每个孔内接1头试虫，置于正常条件下培养。接虫2h～4h后，待试虫取食完含药叶碟后,在培养板孔内加人清洁饲料继续饲养至调查,淘汰未食完一张完整叶碟的试虫。4调查处理后24 h调查试虫死亡情况,记录总虫数和死虫数。根据试验要求和药剂特点，可缩短或延长调查时间。5数据统计与分析5.1计算方法根据调查数据,计算各处理的试虫吞食药量和校正死亡率,计算结果均保留到小数点后两位。试虫吞食药量按式(1)计算：Vi= exV?(1)m式中:Vi --每克质量昆虫吞食药液量，单位为微克每克（μug/g）；处理药液的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L)；0V²一一滴加药液体积,单位为微升(μL);昆虫质量，单位为克(g)。m校正死亡率按公式(2)、(3)计算，单位为百分率（%）：K×100 .Pr(2)N式中:P1死亡率;K.死亡虫数;N-处理总虫数。P,-Po100(3)P2 :1-Po式中:P2校正死亡率；P.处理死亡率;-空白对照死亡率。Po—若对照死亡率5%,无需校正;对照死亡率在5%～20%之间,应按公式(3)进行校正;对照死亡率20%,试验需重做。5.2统计分析用统计分析系统(SAS)、数据处理系统(DPS)等软件进行分析,计算各药剂的 LCso、LCgo、b值(标准2 NY/T 1154.2--2006误)等值及其95%置信限,评价供试药剂对靶标昆虫的胃毒活性。6结果根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告，并列出原始数据。3 中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则杀虫剂第2部分：胃毒活性试