NY_T 2186.3-2012微生物农药毒理学试验准则第3部分：急性注射毒性/致病性试验.pdf

ICS 65.020.01B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2186.3—2012微生物农药毒理学试验准则第3部分：急性注射毒性/致病性试验Microbial pesticide toxicological test guidelines-Part 3 : Acute injection toxicity/pathogenicity study2012-06-06发布2012-09-01实施中华人民共和国农业部-发布 NY/T 2186.3—2012前 言NY/T2186《微生物农药毒理学试验准则》分为以下几部分：-第1部分：急性经口毒性/致病性试验；一第2部分：急性经呼吸道毒性/致病性试验；一第3部分：急性注射毒性/致病性试验；一第4部分：细胞培养试验；-一第5部分：亚慢性毒性/致病性试验；一第6部分：繁殖/生育影响试验。本部分为《微生物农药毒理学试验准则》的第3部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：张丽英、陶传江、李敏、孟宇晰、闫艺舟、叶纪明。 NY/T 2186.3—2012微生物农药毒理学试验准则第3部分：急性注射毒性/致病性试验1 范围本部分规定了急性注射毒性/致病性试验的基本原则、方法和要求。本部分适用于为微生物农药登记而进行的急性注射毒性/致病性试验。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1急性注射毒性/致病性acute injection toxicity/pathogenicity经静脉或腹腔注射给予微生物农药产生的有害效应。3试验目的通过注射给药和给药后适当时间的观察，提供微生物农药毒性、感染性和致病性的初步信息，了解微生物越过皮肤屏障后引起的健康损害作用。4试验概述实验动物经静脉或经腹腔注射给予一定剂量的微生物农药，给药后观察引起的效应和死亡情况。对静脉注射给药试验，还要估计微生物农药的清除情况。试验中死亡和试验结束时处死的动物应进行大体解剖检查。一般情况下，较小的微生物（如细菌、病毒）采用静脉注射方式给药，较大的微生物（如真菌、原生动物)采用腹腔注射方式给药。5受试物5.1应全面了解受试微生物农药的基本情况和特征。受试物的形态应该与申请登记产品的形态相同。此外，受试物的生长阶段、包含的细胞器和附属物以及表型特征（包括引入基因的表达产物)等，也应尽可能与申请登记产品的相同。如果有文献表明可能暴露于微生物农药的其他形态，或微生物农药在宿主内可能会发生形态变化，也可用这些形态进行试验5.2某些受试物因物理性质而无法进行注射给药时，可以用微生物的纯感染性形态进行试验，但是必须说明相应的理由。6试验步骤6.1动物选择6.1.1种属和品系首选大鼠或小鼠，应选择常用的实验品系。选用其他种属动物应说明理由。实验动物体内应无特定微生物或寄生虫存在。6.1.2年龄和性别选择初成年动物，大鼠7周～9周，小鼠6周～8周。使用雌雄两种性别，每种性别的动物数相同。1 NY/T 2186.3—2012雌性动物应是未孕和未经产的。实验动物体重差异不超过同性别动物平均体重的土20%。6.1.3数量试验组至少用10只动物（雌雄各5只）。此外，还需要提供足够数量的动物用于试验中期检查以及设立对照组。6.2对照组6.2.1需要设一个平行的未经处理的对照组，雌雄动物各2只，不需要设环境对照组6.2.2一般不需要设立单独的溶剂或介质对照组，除非溶剂或介质的毒性未知。6.2.3必要时，设立给予灭活受试物（如丧失繁殖、发育或脱孢囊的能力)的对照组，可有助于评价受试物的毒性。采用的灭活方式应能保持微生物结构的完整性。6.3给药方案6.3.1给药剂量试验组动物给药剂量至少为1.0×107单位/只。如剂量达不到1.0×10°单位/只，应说明理由。6.3.2溶剂试验所用溶剂应能保持微生物的生存、发育或脱包囊能力，以及在合适宿主内寄生和对宿主的感染能力。6.3.3给药容量注射给药容量一般为每100g体重0.5mL～1mL。应尽量减少实验动物间给药容量的差异。6.3.4剂量定量根据受试物的微生物种类选择测定给药单位数的定量技术。如果可能，每次给药都要对有活力、有潜在活力或有感染性的受试物的单位数进行定量。与生物数量相关的代谢测定可作为菌丝体形态定量的首选技术。剂量定量宜和试验同步进行。6.4给药方式受试物经静脉或腹腔一次性注射给药。如果一次无法完成注射给药，可在24h内分几次给予。6.5观察期给药后至少观察21d。根据受试物给药类型、清除情况、毒性和致病性体征出现和消失时间以及动物死亡时间，可适当延长观察时间。6.6实验动物的观察6.6.1每天对所有实验动物至少进行一次详细的临床观察。每天应进行必要的额外观察，并采取适当的