SCT 7205.2-2007牡蛎包纳米虫病诊断规程 第2部分：组织病理学诊断法.pdf

ICS 65.020.30B 41Sc中华人民共和国水产行业标准SC/T 7205.2-2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第2部分：组织病理学诊断法Diagnostic Protocols for Bonamiosis of Oyster-Part 2 : Histopathological Method2007-09-01实施2007~06-14发布中华人民共和国农业部·发布 SC/T 7205.2---2007前言SC/T7205《牡蛎包纳米虫病诊断规程》分为三个部分：-第1部分：组织印片的细胞学诊断法；一第2部分：组织病理学诊断法；第3部分：透射电镜诊断法。本部分为SC/T7205的第2部分。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国水产标准化技术委员会归口。本部分起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站、深圳出入境检验检疫局。本部分主要起草人：杨冰、黄健、陈爱平、江育林、王崇明、王秀华、魏琦、刘莉。 SC/T 7205.2—2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第2部分：组织病理学诊断法1 范围SC/T7205的本部分规定了牡蛎包纳米虫病组织病理学诊断法的原理、试剂与材料、仪器设备、操作步骤和结果判定。本部分适用于牡蛎及其他贝类感染包纳米虫情况的普查和诊断。.....2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。SC/T7202.3一2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法SC/T7205.1一2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法3原理3.1牡蛎包纳米虫及其病理学特征见SC/T7205.1一2007(牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法)中3.1的规定。3.2技术原理见SC/T7202.3-2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法中3.2的规定。4试剂和材料见SC/T7202.3—2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程：第3部分：组织病理学诊断法)中4的规定。阳性对照相应为受包纳来虫感染且显示明显病理变化的牡蛎组织切片(H-E染色）。阴性对照为未受包纳米虫感染的正常的牡蛎组织切片（H-E染色）。5仪器设备见SC/T7202.3—2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法）中5的规定。6操作步骤6.1样品准备6.1.1样品的采集按SC/T7205.1一2007(牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法)附录B的规定执行。6.1.2取活体牡蛎，打开贝壳，用5号针头分3～4个部位在软组织中注射0.5mLDavidsonsAFA固定液，从背到腹将软组织切下一小片，确保组织块中包含有心脏、鳃和消化腺等组织，立即放入DavidsonsAFA固定液中。如果个体较小，则将贝的整个软组织从壳中取出，放人固定液中固定24h，随后换为I SC/T 7205.2200770%乙醇保存。固定液的体积应超出样品体积10倍以上。6.1.3组织进行脱水和包埋前先要取材切块，将固定样品根据其组织定位，切削成约3mm~5mm的方块，厚度不超过5mm。确保组织块中包含有心脏、鳃和消化腺等组织。6.2切片制备程序按SC/T7202.3一2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法）中6.2～6.10的规定执行。每个牡蛎样品切取两块以上包含心腔和鳃丝的不连续切片分别检查。7结果判定7.1经H-E染色后的病原寄生虫清晰可见。此寄生虫大小约2 μm～5μm,存在于血细胞内或游离在结缔组织、鳃、内脏或外套膜上皮间。7.2必须要在血细胞内看到病原寄生虫才能确定是阳性结果。7.3诊断结果可疑时,补充透射电镜诊断法进行结果确认。2