WST 92-1996血中锌原卟啉的血液荧光计测定方法.pdf

WS/T92-1996前前言本标准适用于检测职业接触铅的人群血中锌原吓啉的浓度。本标准是参考了国外的检测厅法·我国情况经过实验室研究和现场验证后提出的。本标准与GB11504一89的附录D的资格等效本标准从1997年9月1日起实施。本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准起草单位：青岛市卫生防疫站、中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所。本标准主要起草人：贺宝芝、王淑青、郝文、王敢峰、线引林，本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。 中华人民共和国卫生行业标准血中锌原叭啉的血液荧光计测定方法WS/T 92-1996Blood--Determination of zinc protoporphyrin-Hematofluorometer method1 范围本标准规定了用血液荧光计测定血中锌原吓啉浓度的方法。本标准适用于接触铅的工人血中锌原叶啉浓度的测定。2原理锌原叶啉(ZPP)具有特征性荧光光谱。血中ZPP在425nm入射光的激发下，发射光波长为591nm时，用校准过的ZPP血液荧光计，表面荧光法测量其荧光强度，直接读出ZPP含量的μg/gHb值进行定量。3 仪器3.1直读式血液荧光计.灵敏度0.1 μgZPP/gHb;测量范围0~200μg/gHb；相对湿度≤80%时能稳定工作。3.2盖玻片空白值相当于1.2～3.5μgZPP/gHb。或更佳者。3.3血色素吸管，20μL刻度。3.4采血针头。4 试剂4.1肝素稀释液.1ml.含125单位。4.2血中锌原叶啉标准物质。5采样、运输和保存用血色素吸管取未末梢血20μl.，置于盖玻片上，立即测定。采血后如不能立即测定，可取60μl.将血样注入聚乙烯小试管中（预先加入40uL肝素稀释液）混匀、加塞，于保温瓶中加冰运送.置于4（冰箱中，可保存三天。6分析步骤6.1插上电源，打开血液荧光计，预热15min。6.2将清洁的盖玻片置于进样台上.测定空白读数。6.3将血中ZPP标准物质点在盖玻片上，用大头针或细玻棒使血液铺满测量区，其面积要大于进样台透孔，读数。每次读数重复2次，取平均值。如果标准物质的测得值与空白值之差落在标准物质的给定值范围之内，则说明仪器处于正常工作状态。1997-09-01实施中华人民共和国卫生部1997-01-11批准 WS/T92-19966.4换上清洁盖玻片，取末梢血1滴加在盖玻片上，使血液铺满测量区，读取显示器的数字。7 计算如仪器测定值用ug/gHb表示，则需同时测定血红蛋白，并用下列公式计算：ZPP（μg/gHb）=样品读数一空白读数.(1)ZPP(μg /L) = ZPP(μg/gHb) × Hb(g/L)(2)式中：Hb-用鼠化高铁血红蛋白法测定的1000ml.血中血红蛋白的克数·g/L。8说明8.1本法的最低检出浓度，取20μL血样时为0.1μg/gHb；标准曲线线性范围0～15μg/gHb；批内精密度：RSD=0.27%～1.93%（ZPP含量3.51～15.1μg/gHb.n=6）；准确度：血中ZPP标准物质的测得值，三个浓度都在给定值的不确定度范围之内，符合率100%（给定浓度：3.51±0.58.6.33土0.97.15. 1±2. 92 μg/gHb,n=6)。8.2应用血中ZPP标准物质对仪器进行校准。8.3也可以使用抗凝的静脉血样测定ZPP。但不能使用生理盐水稀释的血样。血样放至半干或放至全干后，测定结果会显著偏高或偏低。8.4所用盖玻片必须很清洁，如手指触及测量区即能使结果偏高。8.5血样如未铺满测量区，或内有气泡，都能影响测定结果。8.6缺铁性贫血患者锌原叶琳亦可能增高。