SN_T 4532.4-2017商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法四.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4532.4—2017商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法四Commercial kit test method-Beta-lactams-Test method IV2017-07-21发布2018-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T4532.4—2017前言本部分是SN/T4532《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类》的第4部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、北京柏奥泰科技有限公司。本部分主要起草人：刘金华、聂丹丹、刘韬、王玮琳、罗雁非、郑晶、刘阳、芦春梅、曲辉、彭勃、牟峻、邹明强。 SN/T4532.4—2017商品化试剂盒检测方法-内酰胺类方法四1范围SN/T4532的本部分规定了牛奶样品中β-内酰胺类药物的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中β-内酰胺类药物残留定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定。4试剂与材料4.1β内酰胺类检测试剂盒1)4.1.1本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。4.1.2商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效斯不得少于12个月。4.1.3试剂盒组成如下：a）β-内酰胺类测试纸条；b）微孔试剂（胶体金标记的β-内酰胺类抗体）。4.2对照品β-内酰胺类阳性及阴性对照品。5仪器设备5.1计时器。5.2移液器：200μL。1）北京柏奥泰科技有限公司产品，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。1 SN/T4532.4—20176样品制备检测前样品需回室温（22.5士2.5）℃，并充分混匀。7分析步骤7.1取出所需数量的板孔和测试条，回温至室温（22.5土2.5)℃。7.2用一次性吸头吸取200μL牛奶样品于反应孔中，混匀，在室温下孵育3min。测试条，进行结果判定。7.3将试纸条垂直插到牛奶样品中保持4从反凡8结果判定通过目测检测线（T线）和控制线（C线）的颜色深浅来进行结果判定。目视结果判定依据：无效：控制线（C线不显色；a)阴性：检测线（T线）颜色明显比控制线（C线）颜色深；b)弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当；c)d)强阳性：检测线（T线）颜色明显弱于控制线（C线）。9方法性能指标9.1检出限青霉素G：4μg/kg；氨芊青霉素：5μg/kg；阿莫西林：5μg/kg；邻氯青霉素：8ug/kg；苯甲异嗯唑青霉素：8μg/kg；双氯青霉素：8μg/kg；萘夫西林：30μg/kg头孢噻呋：100μg/kg；头孢匹林：15μg/kg头孢哌酮：20μg/kg；头孢洛宁：10μg/kg。头孢唑林：50μg/kg；头孢喹：20ug/kg；9.2特异性当浓度≤25 μg/kg时，去甲基金霉素、甲烯土霉素、四环素、土霉素、金霉素、强力霉素、林可霉素、氟苯尼考、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、头孢呋、头孢乙腈、头孢氨芒均无交叉反应。 SN/T4532.42017附录A（资料性附录）牛奶中β内酰胺类检测试纸条评价结果2)A.1灵敏度灵敏度见表A.1。表A.1灵敏度药物名称检测限范围/（μg/kg）验证浓度水平/（μg/kg）4青霉素GpenicillinG3~44~55氨苄青霉素Ampicillin阿莫西林Amoxicillin54~54~88邻氯青霉素Cloxacillin苯甲异嗯唑青霉素Oxacillin4~88双氯青霉素Dicloxacillin5~88萘夫西林Nafcillin15~3030100头孢噻呋Ceftiofur75~1006~1515头孢匹林Cephapirin头孢唑啉Cefazolin35~5050头孢喹Cefquinome15~2020头孢哌酮Cefoperazone10~202010头孢洛宁Cefalonium3~10A.2特异性当浓度25μg/kg时，去甲基金霉素、甲烯土霉素、四环素、土霉素、金霉素、强力霉素、林可霉素、氟苯尼考、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、头孢呋